[发明专利]与鸡柔嫩艾美尔球虫抗性相关的lncRNA及其应用有效
| 申请号： | 202210936636.1 | 申请日： | 2022-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN115961063B | 公开（公告）日： | 2023-08-22 |
| 发明（设计）人： | 戴国俊;于海亮;王琪;糜长浩;汤建强;张跟喜;张涛;谢恺舟;赵振华;王金玉 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柔嫩 艾美尔球虫 抗性 相关 lncrna 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.lncRNA BTN3A2的过表达载体在制备治疗鸡柔嫩艾美尔球虫感染的药物或试剂中的应用，其特征在于，所述lncRNA BTN3A2的过表达载体包括pcDNA3.1-lncRNA，所述lncRNABTN3A2的Genebank序列号为XM_025145936.1。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述pcDNA3.1-lncRNA构建方法包括：先通过PCR法扩增目的lncRNA全长序列并引入酶切位点，PCR扩增引物序列如SEQ ID NO.5和SEQID NO.6所示，用BamHI和EcoRI对片段进行酶切，37℃ 酶切2小时，酶切体系如下：10×Buffer：5μl，上述扩增得到的模板42μl，BamHI和EcoRI各1.5μl，用BamHI和EcoRI对载体pcDNA3.1(+)进行酶切，37℃ 酶切2小时，酶切体系如下：10×Buffer：5μl，pcDNA 3.1(+)：5μg，BamHI和EcoRI各1.5μl，ddH2O补足50μl，用 T4 DNA ligase 连接双酶切得到的lncRNABTN3A2目的片段和线性化的载体，22℃连接2小时，将连接产物转化感受态细胞，摇菌，然后质粒抽提。
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