[发明专利]解淀粉芽孢杆菌来源的pH诱导型启动子及其应用在审
| 申请号： | 202210945719.7 | 申请日： | 2022-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN116064521A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 罗正山;徐虹;严一凡;朱逸凡;杜姗姗;李莎;王瑞 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/07;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 淀粉 芽孢 杆菌 来源 ph 诱导 启动子 及其 应用 | ||
1.pH诱导型启动子，其特征在于，具有如SEQ ID NO.1～10任一所示的核苷酸序列。
2.含有权利要求1所述pH诱导型启动子的重组表达载体。
3.含有权利要求2所述重组表达载体的微生物细胞。
4.根据权利要求3所述的微生物细胞，其特征在于，所述微生物细胞为细菌细胞或真菌细胞。
5.根据权利要求4所述的微生物细胞，其特征在于，所述细菌包括但不限于：大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)。
6.一种调控目的蛋白表达量的方法，其特征在于，将编码目的蛋白的基因连接至权利要求1所述的pH诱导型启动子的下游，将含有所述基因的微生物在培养基中培养，并在pH5.0～8.0的环境下诱导所述pH诱导型启动子启动目的基因的转录。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述微生物为枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将编码目的蛋白的基因连接至表达载体上，并使所述基因位于SEQ ID NO.2、SEQID NO.3或SEQ ID NO.8所示pH诱导型启动子的下游；
(2)将步骤(1)获得的重组表达载体通过电转的方法转入解淀粉芽孢杆菌中，获得表达目的基因的重组微生物；
(3)将步骤(2)获得的重组微生物在pH为5.0-8.0的环境下培养。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述目的蛋白包括但不限于绿色荧光蛋白。
10.权利要求1所述的pH诱导型启动子，或权利要求2所述的重组表达载体，或权利要求3～5任一所述的微生物细胞在调控目的基因表达方面的应用。
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