[发明专利]一种扩增速度可控的PCR装置及其构建方法和运用在审
申请号: | 202210949399.2 | 申请日: | 2022-08-09 |
公开(公告)号: | CN116287154A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 蒋兴禄 | 申请(专利权)人: | 广西医科大学 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12M1/34;C12M1/02;C12M1/36;C12M1/00 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 唐循文 |
地址: | 530021 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 扩增 速度 可控 pcr 装置 及其 构建 方法 运用 | ||
1.一种扩增速度可控的PCR装置的构建方法,其特征在于,构建步骤为:首先,配制不同浓度的动物血清白蛋白或者胶原蛋白,再加入DNA聚合酶、模板、引物、镁离子、PCR反应缓冲液和去离子水,所述终溶液中动物血清白蛋白浓度为2.5 mg/mL至50 mg/mL;然后,高温加热成胶制备扩增速度可控的PCR装置。
2.根据权利要求1所述扩增速度可控的PCR装置的构建方法,其特征在于,配制质量浓度为20%的成胶溶液;配制10×PCR缓冲液: 100 mM 25℃ pH 8.8 Tris-HCl,500 mM KCl,0.8% (v/v) Nonidet P40;MgCl2:15 mM;DNA聚合酶:Taq DNA 聚合酶或热启动Taq DNA聚合酶,dNTP:2.5 mM,上游引物:10 mM,下游引物:10 mM,DNA模板:cDNA;将成胶溶液:0.5-2μL,10×PCR缓冲液:2μL,MgCl2:2μL,DNA聚合酶:0.1μL,dNTP:2.5 mM,上游引物10 mM:0.1-0.5 μL ,下游引物10 mM:0.1-0.5 μL,DNA模板:cDNA 5μL,补充去离子水至20μL 积的液体置于PCR仪中95℃加热5 min;通过调节胶溶液的浓度,或调节模板和引物浓度,控制扩增速度。
3.根据权利要求2所述扩增速度可控的PCR装置的构建方法,其特征在于,所述成胶溶液为动物血清白蛋白或胶原蛋白质。
4.权利要求1-3任一所述构建方法制得的扩增速度可控的PCR装置。
5.权利要求4所述装置在检测分析初始DNA模板浓度中的应用。
6.权利要求4所述装置在扩增速度可控PCR中的应用。
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