[发明专利]快速鉴定蓝莓果型大小的分子标记引物组合及其应用在审
申请号: | 202210954098.9 | 申请日: | 2022-08-10 |
公开(公告)号: | CN115181814A | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
发明(设计)人: | 焦云;王利平;沈颖 | 申请(专利权)人: | 宁波市农业科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 江苏斐多律师事务所 32332 | 代理人: | 张佳妮 |
地址: | 315040 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 鉴定 蓝莓 大小 分子 标记 引物 组合 及其 应用 | ||
1.一组快速鉴定蓝莓果型大小的分子标记引物组合,其特征在于所述引物组合包括BS-23250-F和BS-23250-R,具体序列为:
BS-23250-F:5’-CTTTCTATTCTCGTGTTCTGTAATT-3’,
BS-23250-R:5’-CCAACCAAATTATTATTTGAGAA-3’。
2.权利要求1所述的分子标记引物组合在快速鉴定蓝莓是否为中果或小果果型性状上的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于其步骤包括:
(1)引物合成:合成权利要求1所述的引物组合BS-23250-F和BS-23250-R;
(2)DNA的提取:提取待测蓝莓样本中的基因组DNA;
(3)PCR扩增:以上述蓝莓基因组DNA作为模板,使用引物BS-23250-F和BS-23250-R进行PCR扩增,预先加入至少一个已确定蓝莓果型大小性状为中果或小果的样本基因组DNA作为内参;
(4)扩增产物检测与分析:使用荧光定量PCR仪进行基因型检测分析,若有PCR扩增产物出现且与内参样本聚集为一组者即可视为中果或小果性状类型;若没有任何PCR扩增产物出现者视为其他类型。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述步骤(3)中PCR扩增的体系为:20ng/μL的样本基因组DNA模板1.0μL,2×SG Fast qPCR Master Mix 5μL,10μM的BS-23250-F引物0.5μL,10μM的BS-23250-R引物0.5μL,ddH2O补足至10μL;扩增PCR程序如下:95℃3min,然后运行32个循环反应,每个循环为95℃3s,60℃30s。
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