[发明专利]抗SARS-CoV-2病毒N蛋白的结合抗体及其应用

说明书

本发明公开了抗SARS‑CoV‑2病毒N蛋白的结合抗体及其应用。本发明所保护的单克隆抗体N2E5重链可变区的氨基酸为序列表中SEQ ID NO.1所示，轻链可变区的氨基酸序列为序列表SEQ ID NO.2所示；单克隆抗体N2E5重链可变区的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.5所示，轻链可变区的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.6所示。N2E5和N8C6与N蛋白的动力学常数K_D分别为1.42×10^‑8M和1.31×10^‑8M。该抗体与新冠病毒N蛋白亲和力高，可以广泛用于新冠抗体检测试剂盒、临床治疗等。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及抗SARS-CoV-2病毒N蛋白的结合抗体及其应用。

背景技术

新型肺炎(现称为COVID-19)是由冠状病毒SARS-CoV-2引起的。COVID-19患者多表现为发热、咳嗽等轻度或中度症状，重度患者可发展为急性呼吸窘迫综合征、急性心脏损伤、多器官衰竭和继发性感染。治愈的患者也会存在不可逆转的肺部纤维化，生殖系统和造血系统也会发生潜在损害。

SARS-CoV-2属于冠状病毒科正冠状病毒亚科β属Sarbecovirus亚属，与严重急性呼吸综合征冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus,SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus,MERS-CoV)属于同属的不同亚属。SARS-CoV-2单链核糖核酸基因组大小约为29.9kb，由11个基因组成，基因组按5′-复制酶(orf 1/ab)-结构蛋白[刺突蛋白(S)-包膜蛋白(E)-膜蛋白 (M)-核衣壳蛋白(N)]-3′的顺序排列。

包膜锚定的S蛋白能在感染的过程中附着宿主，S蛋白的胞外结构域有S1和S2 两个亚基，S1亚基与宿主细胞表面的受体结合，再通过S2亚基介导病毒膜和宿主膜融合。M蛋白可与核衣壳结合，在包膜的形成及装配过程中发挥作用。E蛋白主要负责病毒的组装和释放。N蛋白为核衣壳蛋白，与病毒RNA基因组结合。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何识别新型冠状病毒的N蛋白和/或如何获得抗新型冠状病毒N蛋白的结合抗体。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了抗新型冠状病毒N蛋白的抗体。所述抗体为A或/和B。所述A可为单克隆抗体N2E5或其抗原结合部分和/或单克隆抗体 N8C6或其抗原结合部分。所述单克隆抗体N2E5或其抗原结合部分含有名称可为 N2E5-V_H的重链可变区和名称为N2E5-V_L的轻链可变区。所述N2E5-V_H和N2E5-V_L均由决定簇互补区和框架区组成。所述N2E5-V_H和所述N2E5-V_L的决定簇互补区均可由CDR1、CDR2和CDR3组成。

所述N2E5-V_H的CDR1的氨基酸序列可为序列表中SEQ ID NO.1的第26-33位。

所述N2E5-V_H的CDR2的氨基酸序列可为序列表中SEQ ID NO.1的第51-57位。

所述N2E5-V_H的CDR3的氨基酸序列可为序列表中SEQ ID NO.1的第96-110位。

所述N2E5-V_L的CDR1的氨基酸序列可为序列表中SEQ ID NO.2的第26-31位。

所述N2E5-V_L的CDR2的氨基酸序列可为序列表中SEQ ID NO.2的第49-51位。

所述N2E5-V_L的CDR3的氨基酸序列可为序列表中SEQ ID NO.2的第88-98位。