[发明专利]一种丝素蛋白生物材料墨水及其制备方法和应用有效
申请号: | 202210959142.5 | 申请日: | 2022-08-10 |
公开(公告)号: | CN115227871B | 公开(公告)日: | 2023-08-01 |
发明(设计)人: | 陈明学;李扬扬;方永聪;周一新;杨德金;邵宏翊;张颂阳 | 申请(专利权)人: | 北京积水潭医院 |
主分类号: | A61L27/22 | 分类号: | A61L27/22;A61L27/56;B33Y70/00;B33Y80/00;B33Y10/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 任晓云 |
地址: | 100096 北京市西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丝素 蛋白 生物 材料 墨水 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种组织工程支架的制备方法,包括如下步骤:以丝素蛋白生物材料墨水作为打印墨水采用3D打印机进行打印;打印后将支架进行冷冻升华干燥,然后将支架置于交联剂中进行交联,再次冷冻升华干燥,得到所述组织工程支架;
所述打印的温度为低温;
所述丝素蛋白生物材料墨水的制备方法,包括如下步骤:
(1)对蚕茧进行脱胶处理,得到脱胶后的丝素蛋白;
(2)将所述脱胶后的丝素蛋白溶于甲酸溶液中,溶解后离心,弃上清液,得到高浓度丝素蛋白溶液;
(3)在所述高浓度丝素蛋白溶液中添加乙酸溶液或者冰醋酸和1,4-二氧六环的混合液,即得到所述丝素蛋白生物材料墨水。
2. 根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述脱胶后的丝素蛋白和甲酸溶液的比为5~10 g:200 mL;
所述甲酸溶液的质量百分浓度大于等于50%小于100%;
所述脱胶后的丝素蛋白溶于甲酸溶液的方法包括将所述脱胶后的丝素蛋白加入甲酸溶液中,25~70℃加热并搅拌,直至完全溶解。
3. 根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述离心为10000~100000 rpm离心60~120min。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述乙酸溶液和所述高浓度丝素蛋白溶液的体积比为1:10~40;
所述乙酸溶液的质量百分浓度大于等于80%小于100%;
所述冰醋酸和1,4-二氧六环的混合液中,所述冰醋酸和1,4-二氧六环的体积比为4~5:1;
所述冰醋酸和1,4-二氧六环的混合液的体积和所述高浓度丝素蛋白溶液的体积比为1:10~40。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述蚕茧的脱胶处理包括如下步骤:将所述蚕茧加入碳酸钠溶液中,煮沸,冲洗并自然风干。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述碳酸钠溶液的质量百分浓度为0.1%~10%;
所述煮沸的次数为1~4次;每次煮沸的时间至少1 h。
7. 根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于:所述每次煮沸的时间为1 h。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述低温的温度范围为-10~-80℃;
所述冷冻升华干燥的条件如下:真空度100 mTorr,温度-20~-60℃,时间12~72 h;
所述交联剂为包括乙基-二甲基胺-丙基碳化二亚胺和n-羟基琥珀酰亚胺的溶液;
所述交联的温度为0~25℃,时间为12~72 h。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于:所述交联剂的溶剂为乙醇、水、丙酮和氯仿中的至少一种;
所述交联剂中,所述乙基-二甲基胺-丙基碳化二亚胺的浓度为10~100 mmol/L;n-羟基琥珀酰亚胺的浓度为10~100 mmol/L。
10.权利要求1-9中任一项所述的制备方法制备得到的组织工程支架。
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