[发明专利]一种N-N-双-恶唑烷酮生物碱类化合物、制备方法及在医药领域的应用

说明书

本发明涉及一种N‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物、制备方法及在医药领域的应用。本发明提供了从忍冬叶中分离纯化的两种新的N‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱同分异构体及其制备方法；所述化合物结构如下式1或式2所示：经验证，上述化合物1和2对AAPH所致肝癌细胞氧化损伤具有显著保护作用，并且化合物1和2均可不同程度抑制APAP对HepG2细胞的损伤，有望应用于医药途径的开发。

技术领域

本发明属于恶唑烷酮生物碱类化合物技术领域，具体涉及一种N-N-双-恶唑烷酮生物碱类化合物、所述化合物的制备方法、包含所述生物碱类化合物的药物组合物及其在医药领域的应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

生物碱类化合物是一类含氮的碱性有机化合物，是天然产物中重要的一类有效成分，广泛分布于毛茛科、罂粟科、防己科、茄科、夹竹桃科、芸香科、豆科、小檗科等植物中，根据生物碱基本结构的不同可分为60多类，如有机胺类、吡咯烷类、吡啶类等。文献调研发现生物碱的药理活性众多，主要包括抗肿瘤、抗炎、镇痛、抗菌、抗病毒等，该类化合物有良好的开发应用前景。

忍冬(Lonicera japonica Thunb.)为忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)多年生半常绿缠绕灌木，是一种具有悠久历史的常用中药，其花、茎、叶均可入。忍冬叶为忍冬科植物忍冬的干燥叶，即金银花叶，质地较厚，叶对生，呈卵形、椭圆形或长椭圆形，被覆绒毛。作为金银花的副产品，产量较大。现代研究表明忍冬叶中含有环烯醚萜类、黄酮类、有机酸、挥发油等化学成分，药理活性实验发现忍冬叶具有抗病原微生物、抗炎、抗氧化、降血脂等作用。文献报道金银花中存在生物碱类成分，而忍冬叶中生物碱类成分未见报道。

发明内容

为了充分发掘忍冬叶的药效物质基础，本发明对忍冬叶化学成分进行了研究，从中得到新型结构的N-N-双-恶唑烷酮生物碱类同分异构体，且所得化合物具有显著的抗氧化和保肝活性，有望应用于化药的开发。

基于上述技术成果，本发明提供以下技术方案：

本发明第一方面，提供一种N-N-双-恶唑烷酮生物碱类化合物，所述化合物具有如下式1或式2所示的结构：

上述第一方面所述N-N-双-恶唑烷酮生物碱类化合物，还包括式1或式2所示化合物药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、代谢产物或前药；其中，上述化合物药学上可接受的或酯主要包括为了改善所述化合物物理、化学性质所进行的成盐或成酯修饰，例如，为了改善水溶性等。

本发明第二方面，提供第一方面所述N-N-双-恶唑烷酮生物碱类化合物的制备方法，以忍冬叶乙醇提取物为原料分离得到，所述分离包括如下步骤：

(1)采用大孔树脂对忍冬叶乙醇提取物进行梯度洗脱，洗脱液依次为水、35～45％乙醇、55～65％乙醇、75～85％乙醇和92～98％乙醇，获取水洗脱部分，加入硅胶拌样；

(2)制备硅胶柱色谱，所述柱色谱中硅胶采用二氯甲烷混匀后装柱；将上述步骤(1)中拌样后的硅胶加入柱色谱，并采用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，所述洗脱液中二氯甲烷、甲醇两试剂的洗脱梯度依次为13～17:1、8～12:1、4～6:1、0.8～1.2:1(v/v)；合并上述各部分洗脱液并浓缩依次得到Fr.1～Fr.4四个部分；

(3)将上述Fr.1部分加入甲醇溶液溶解，通过MCI中压制备色谱进行分离，以甲醇-水体系进行梯度洗脱，上述洗脱液中甲醇的浓度依次为4～6％、13～17％、23～27％、33～37％、96～100％；收集上述洗脱液通过HPLC进行检查将相似馏分进行合并，得到Fr.1-1～Fr.1-10共十个组分，取组分Fr.1-1通过半制备色谱进行分离纯化，流动相为乙腈-0.0.08～0.12％甲酸水，得到化合物1和化合物2.