[发明专利]功能性DNA凝胶的制备方法及应用在审
申请号: | 202210967656.5 | 申请日: | 2022-08-12 |
公开(公告)号: | CN116103277A | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 梁兴国;史婷婷;安然;侯玉颖 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;G01N33/53;C08F220/56;C08F220/24 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人: | 韩丽萍 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 功能 dna 凝胶 制备 方法 应用 | ||
1.一种功能性DNA凝胶的制备方法,其特征在于,将功能性环状DNA与凝胶单体溶液混合,并加入引发剂和促凝剂进行交联聚合反应,反应过程中凝胶单体穿过所述功能性环状DNA并聚合成为网状结构,使功能性环状DNA以悬挂固定的形式富集于凝胶网络结构上,得到功能性DNA凝胶;所述功能性环状DNA为含有功能性核酸序列的环状DNA。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述环状DNA的长度为59-177nt。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述功能性环状DNA在室温下保持简单二级结构。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述凝胶单体溶液的浓度为8%-30%。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述凝胶单体为丙烯酰胺类单体。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述丙烯酰胺类单体为丙烯酰胺和N,N二甲基丙烯酰胺,二者的质量比为(25-33):1。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述引发剂为过硫酸铵、偶氮二异丁腈、过氧化二苯甲酰、过氧化二异丙苯、偶氮二异庚腈中的一种或多种;所述促凝剂为四甲基乙二胺或3-二甲胺丙腈。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述功能性环状DNA是采用如下方法制备的:首先设计三条的包含功能性核酸序列的DNA链,且分别设计不同序列的辅助DNA用于将三条DNA链连接成环;利用外切酶去除环状DNA中混杂着的线性及双链DNA;抽提醇沉,去除环状DNA制备过程中的镁离子和蛋白质,得到纯净的环状DNA。
9.权利要求1所述的功能性DNA凝胶在脱除或富集溶液中靶标物质方面的应用,其特征在于,所述功能性DNA具备靶标物质结合作用,将所述功能性DNA凝胶浸入含有靶标物质的水溶液中,环状DNA链上的功能性核酸序列特异性结合靶标物质;将吸附了靶标物质的凝胶从水溶液中分离出去。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述应用为脱除溶液中的重金属离子、毒素、兽药或农药,或者富集溶液中的小分子核酸。
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