[发明专利]一种基于CBA法的MOG-IgG自身抗体的检测材料及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种基于CBA法的MOG‑IgG自身抗体的检测材料及其制备方法和应用，属于抗体检测技术领域。本发明将用于MOG‑IgG标准检测的亚型MOGα1重组载体与最长的亚型MOG10重组载体共转，得到能够同时过表达MOGα1和MOG10的细胞爬片(命名为MOGα1+10)用于CBA法检测MOG‑IgG，延长了爬片保质期，提高了检测灵敏度，同时在部分MOG‑IgG样品中阳性信号的特异性荧光染色形态更易与非特异性染色区别，这些特点有助于临床样品中MOG‑IgG的检测以及对应疾病的诊断、治疗和预后。

技术领域

本发明属于抗体检测技术领域，具体涉及一种基于CBA法的MOG-IgG自身抗体的检测材料及其制备方法和应用。

背景技术

髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)是一种特异性表达于中枢神经系统(central nervous system，CNS)少突胶质细胞上的髓鞘糖蛋白，定位于CNS髓鞘最外层，由于这种定位，它成为参与免疫介导脱髓鞘的主要靶抗原，可能参与髓鞘的完整和维持以及细胞间的通讯。另外，编码不同亚型的剪接转录变体也已被鉴定，包括alpha1、alpha2、alpha3、alpha5、alpha6、beta1、beta2、beta3、beta5和10，其中IgG反应最强的MOG亚型为alpha1(简称为MOGα1，目前用于MOG-IgG的标准检测)和beta1，而其他亚型被识别的频率较低；新发现的转录变体10代表最长的转录本，并翻译最长的亚型MOG10。

据2018年MOG脑炎国际专家共识研究表明，MOG-IgG具有直接的致病性影响，MOG-IgG现在被认为是一种疾病本身，不同于经典的MS和AQP4-IgG阳性的视神经脊髓炎谱系障碍(NMOSD)，现在通常被称为MOG-IgG相关性脑脊髓炎(MOG-IgG-associated encephalomyel-itis，MOG-EM)。该专家共识针对MOG-IgG抗体的检测和MOG-EM的诊断进行了详细的推荐，将通过使用全长的人MOG蛋白作为靶抗原，用基于细胞的检测方法(cell-Based assay，CBA)检测到的MOG-IgG血清阳性作为MOG脑炎的诊断标准之一。

目前CBA法也是检测MOG-IgG的金标准，但使用CBA法检测抗体目前仍存在产品保质期有限、灵敏度不高，非特异性染色等缺陷。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种基于CBA法的MOG-IgG自身抗体的检测材料及其制备方法和应用，能够有效解决现有技术中检测MOG-IgG出现的保质期短、灵敏度不高以及非特异性染色的技术问题。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了一种基于CBA法的MOG-IgG自身抗体的检测材料，该检测材料是能够同时过表达MOGα1和MOG10的检测材料。

优选地，该检测材料是将MOGα1基因的重组载体和MOG10基因的重组载体共转进细胞后获得的。

优选的，所述MOGα1基因的序列号为NM_206809.4。

进一步优选地，所述的MOGα1基因的重组载体为PCDNA3.1-MOGα1，还可以是17T2A-MOGα1。

优选的，所述MOG10基因的序列号为NM_001363610.2。

优选地，所述的MOG10基因的重组载体为PCDNA3.1-MOG10，还可以是17T2A-MOG10。

进一步优选地，所述细胞为HEK293T细胞。

优选的，所述PCDNA3.1-MOGα1与PCDNA3.1-MOG10共转时的质量总和可以为2-10ug，重组载体质量总和与PEI的质量比≤1；