[发明专利]过表达基因galK、galT及其工程菌有效

专利信息
申请号: 202210980994.2 申请日: 2022-08-16
公开(公告)号: CN116042666B 公开(公告)日: 2023-07-28
发明(设计)人: 张侃;张志乾;张霏霏;吴奕瑞;陈海琪;冼幸游 申请(专利权)人: 山东乾肽生物科技有限公司;态创生物科技(广州)有限公司
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N9/12;C12N15/74;C12P7/16;C12N1/21;C12N15/66;C12R1/145
代理公司: 苏州根号专利代理事务所(普通合伙) 32276 代理人: 项丽
地址: 271100 山东省济南市莱*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 表达 基因 galk galt 及其 工程
【权利要求书】:

1.半乳糖激酶基因galK在提高产溶剂梭菌Clostridium sp. WK产丁醇产量中的应用,其中Clostridium sp. WK的菌株保藏号为GDMCC No.61493,半乳糖激酶基因galK编码的蛋白质序列如SEQ ID No.1所示。

2.UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因galT在提高产溶剂梭菌Clostridiumsp. WK产丁醇产量中的应用,其中Clostridium sp. WK的菌株保藏号为GDMCC No.61493,UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因galT编码的蛋白质序列如SEQ ID No.3所示。

3.一种工程菌WK-Gal-2,其特征在于:其是通过在产溶剂梭菌Clostridium sp. WK中过表达半乳糖激酶基因galK构建而成,所述产溶剂梭菌Clostridium sp. WK的菌株保藏号为GDMCC No.61493,所述半乳糖激酶基因galK编码的蛋白质序列如SEQ ID No.1所示。

4.根据权利要求3所述的工程菌WK-Gal-2,其特征在于:其是通过将半乳糖激酶基因galK构建到梭菌-大肠杆菌穿梭载体pMTL83353中,形成过表达质粒pMTL-galK,将过表达质粒pMTL-galK转化到产溶剂梭菌Clostridium sp. WK中构建而成。

5.一种工程菌,其特征在于:其是通过在产溶剂梭菌Clostridium sp. WK中同时过表达半乳糖激酶基因galK和UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因galT构建而成,所述产溶剂梭菌Clostridium sp. WK的菌株保藏号为GDMCC No.61493,所述半乳糖激酶基因galK编码的蛋白质序列如SEQ ID No.1所示,所述UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因galT编码的蛋白质序列如SEQ ID No.3所示。

6.根据权利要求5所述的工程菌,为工程菌WK-Gal-3,其特征在于:其是通过将半乳糖激酶基因galK和UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因galT构建到梭菌-大肠杆菌穿梭载体pMTL83353中,形成同时含galKgalT基因的共表达质粒pMTL-Pthl-galK-Pthl-galT,其中galKgalT序列前均有Pthl启动子,将共表达质粒pMTL-Pthl-galK-Pthl-galT转化到产溶剂梭菌Clostridium sp. WK中构建而成。

7.根据权利要求5所述的工程菌,为工程菌WK-Gal-4,其特征在于:其是通过将半乳糖激酶基因galK和UDP-葡萄糖-己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因galT构建到梭菌-大肠杆菌穿梭载体pMTL83353中,形成同时含galKgalT基因的共表达质粒pMTL-Pthl-galK-Pfdx-galT,其中galK序列前有Pthl启动子,galT序列前有Pfdx启动子,将共表达质粒pMTL-Pthl-galK-Pfdx-galT转化到产溶剂梭菌Clostridium sp. WK中构建而成。

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