[发明专利]REXO2及其siRNA在抑制PRRSV复制中的应用

说明书

本发明属于基因工程技术领域，涉及REXO2及其siRNA在抑制PRRSV复制中的应用。本发明通过建立细胞模型，利用RNA干扰技术和PRRSV减毒活疫苗株攻毒，检测REXO2沉默对细胞中PRRSV复制的影响，发现REXO2沉默能够显著抑制PRRSV的复制。本发明为预防和治疗猪蓝耳病提供了新的途径。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，涉及REXO2及其siRNA在抑制PRRSV复制中的应用。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive And Respiratory Syndrome,PRRS)，俗称猪蓝耳病，由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome Virus，PRRSV)引起，是世界范围内的重要猪传染病之一，给全球养猪业造成巨大的经济损失。

在生产实践中，预防PRRS的主要策略是接种疫苗。然而，目前的商业PRRSV疫苗存在有效性和安全性问题。利用疫苗难以实现PRRS的有效预防。

REXO2编码RNA核酸外切酶2蛋白，是一种在线粒体中具有活性的寡核糖核酸酶。REXO2蛋白与DNA修复，复制和重组过程相关。研究发现REXO2降解二核苷酸可维持哺乳动物线粒体中的启动子特异性。Laitman等对一个连续两个世代有四名受嗜铬细胞瘤影响的患者的家庭进行了全外显子组测序，并在REXO2基因中鉴定到了一个潜在影响剪接的新候选致病变异(c.531-1GT(NM 015523.3))，该变异与家族中的表型共分离。REXO2蛋白质的缺乏也会导致线粒体核酸含量的大幅下降，并从头破坏线粒体蛋白质的合成。目前关于REXO2研究较少，REXO2对PRRSV的作用尚不清楚。

发明内容

本发明主要目的在于提供REXO2及其siRNA在抑制PRRSV复制中的应用。本发明发现REXO2沉默能够显著抑制PRRSV的复制，本发明为预防和治疗猪蓝耳病提供了新的途径。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明第一方面提供REXO2在抑制PRRSV复制中的应用，通过沉默REXO2能够抑制PRRSV复制。

本发明第二方面提供用于沉默REXO2的siRNA，所述siRNA序列如下：

正向序列为：5’-GGAAGUCUGGUCUAACCAATT-3’；

反向序列为：5’-UUGGUUAGACCAGACUUCCTT-3’。

本发明第三方面提供一种试剂盒，所述试剂盒包含第二方面所述用于沉默REXO2的siRNA序列。

本发明第四方面提供以上第二方面所述用于沉默REXO2的siRNA或第三方面所述试剂盒在制备抑制PRRSV复制中的应用。

本发明第五方面提供以上第二方面所述用于沉默REXO2的siRNA或第三方面所述试剂盒在制备预防和/或治疗猪蓝耳病药物中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下优势：

本发明发现沉默REXO2能够显著抑制PRRSV的复制，用于沉默REXO2的siRNA或试剂盒可用于开发预防和/或治疗猪蓝耳病的药物，从而为预防和治疗猪蓝耳病提供了新的途径。

附图说明

图1为REXO2基因沉默效率图：A为REXO2基因mRNA的相对表达，B为REXO2蛋白的表达；

图2为REXO2基因沉默对PRRSV ORF7基因表达的影响；