[发明专利]蛋白图案化制备方法在审
申请号: | 202210991575.9 | 申请日: | 2022-08-18 |
公开(公告)号: | CN115308992A | 公开(公告)日: | 2022-11-08 |
发明(设计)人: | 陈月月;迟力峰;斯特凡·舒拉特 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学 |
主分类号: | G03F7/00 | 分类号: | G03F7/00;C12N5/09;C12N5/076 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人: | 韩丽萍 |
地址: | 100000 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白 图案 制备 方法 | ||
1.蛋白图案化制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)聚合物刷表面的制备;
(2)原子力显微镜针尖刻蚀
用原子力针尖在聚合物刷表面进行刻蚀,改变聚合物刷的厚度,得到不同厚度的区域,形成表面图案化聚合物刷;
(3)蛋白表面吸附形成图案化结构
室温下将图案化的聚合物刷表面浸泡在蛋白溶液中,聚合物刷的不同厚度对蛋白粘附力不同,浸泡一段时间后用超纯水冲洗图案化聚合物刷,得到在聚合物刷表面形成的蛋白图案化结构。
2.根据权利要求1所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述步骤(1)制备的聚合物刷表面厚度足够厚,使得原子力针尖在聚合物刷表面进行刻蚀时,能够形成不同的厚度区域,所述不同的厚度区域对对蛋白的粘附力不同。
3.根据权利要求1所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述步骤(1)聚合物刷表面的制备,方法如下:以正十四烯和三乙氧基硅烷在氩气气氛下加热至38~42℃,加入karstedt催化剂,在密封管中,于38~42℃条件下搅拌1.5~2.5h,然后加入环己烷和碳酸丙酯,进行相分离,浓缩环己烷相,然后用硅胶FC进行纯化,得到功能化的硅表面;在该功能化的硅表面进行聚合反应,将含引发剂的晶圆自组装单分子膜置于单体中,引发聚合反应,制得聚合物刷。
4.根据权利要求3所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述单体为苯乙烯单体;所述含引发剂的晶圆自组装单分子膜为含烷氧胺NMP引发剂的晶圆自组装单分子膜。
5.根据权利要求4所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,增加烷氧基胺的浓度能够缩短硅表面结合聚合物的目标链长度,从而制得厚度较小的聚合物刷,反之,能够制得厚度较大的聚合物刷。
6.根据权利要求5所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,使用相对于苯乙烯为0.063~0.1mol%浓度的引发剂制备聚苯乙烯刷,得到厚度为22~50nm聚苯乙烯刷;使用相对于苯乙烯为0.2~0.4mol%浓度的引发剂制备聚苯乙烯刷,得到厚度为5~10nm聚苯乙烯刷。
7.根据权利要求1所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述步骤(1)正十四烯烃和三乙氧基硅烷在于40℃条件下反应2h。
8.根据权利要求1所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述步骤(2)具体操作过程:原子力显微镜开机后选择硅接触模式,k≈42Nm-1,扫描速率=0.1,设定点=0.1,扫描尺寸=20m,日期类别选择off,Z范围=200nm,垂直偏转≈0,水平偏转≈0,从nanoscript中Di上使用rec3-v1.c文件,并在宏上单击“run”运行,重复3次。
9.根据权利要求1所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述步骤(3)浸泡8-32小时。
10.根据权利要求1所述的蛋白图案化制备方法,其特征在于,所述步骤(3)蛋白溶液为纯SDF-1蛋白溶液。
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