[发明专利]水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用

权利要求书

1.水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，所述水稻长链非编码RNA基因LAIR的可变剪接亚型或其功能等价物，具备改善水稻产量性状的用途。

2.根据权利要求1所述水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，所述可变剪接亚型的序列如SEQ.ID NO.1-9所示；

包括LAIR-a、LAIR-b、LAIR-c、LAIR-d、LAIR-e、LAIR-f、LAIR-g、LAIR-h、LAIR-i中的一种；

所述可变剪接亚型的功能等价物与SEQ.ID NO.1-9所示序列之间具有99%的同源程度，并均源自水稻转录组的cDNA中。

3.根据权利要求2所述水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，所述的可变剪接亚型在水稻株系中过表达能够增加转基因水稻的株高和/或主穗总粒数。

4.根据权利要求1所述水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，所述水稻长链非编码RNA基因LAIR的应用方法如下：

先从水稻转录组的cDNA中，PCR扩增获得可变剪接亚型，再将可变剪接亚型插入到载体的组成型启动子下游，进行表达载体的构建，再利用表达载体转化受体水稻，最后PCR鉴定筛选阳性转基因水稻株系。

5.根据权利要求4所述水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，所述的载体为pCAMBIA1304载体，所述组成型启动子为CaMV 35s组成型启动子。

6.根据权利要求5所述水稻长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，所述表达载体的构建，其具体步骤如下：

a）先采用PCR方法从水稻转录组的cDNA中，扩增获得可变剪接亚型；

b)再合成插入酶切位点，获得包含有酶切位点的PCR纯化产物，酶切位点为SpeI（5’末端）和BstEII（3’末端）；

c)然后将可变剪接亚型，插入pCAMBIA1304载体的35S组成型启动子下游，即可获得可变剪接亚型的pCAMBIA1304表达载体；

d)最后将可变剪接亚型的pCAMBIA1304表达载体连接产物加入到DH5α感受态细胞中，进行活化复苏并PCR鉴定是否连接成功。

7.根据权利要求5所述的长链非编码RNA基因LAIR可变剪接的应用，其特征在于，其特征在于，所述表达载体转化到水稻受体中的步骤如下：

先将水稻成熟种子去壳消毒后接种在脱分化植物组织培育基上进行诱导愈伤，得愈伤组织细胞，再采用农杆菌转化法，将经纯化的表达载体导入愈伤组织细胞，即完成表达载体到水稻受体的转化。