[发明专利]一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法

说明书

本发明属于鱼类种质资源改良领域，公开了一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法，通过人工催产获得大口黑鲈成熟卵子和翘嘴鳜精液，用Hank’s液将翘嘴鳜精液稀释，在40w紫外灯对翘嘴鳜精液进行灭活处理5‑10min后与大口黑鲈成熟卵子混合，在常温水中进行受精2‑3min，然后在4℃的冷水中进行冷处理10‑15min，再在18‑20℃水中进行静水孵化即得到雌核发育的大口黑鲈。本发明采用翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育成功选育得到雌核发育大口黑鲈后代，生长速度和肉质方面明显强于普通大口黑鲈，在不仅为改良大口黑鲈种质资源提供了良好基础，而且在遗传育种和生物进化方面也具有重大的意义。

技术领域

本发明属于鱼类种质资源改良领域，尤其涉及一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法。

背景技术

大口黑鲈(Micropterus Salmoides)又名加州鲈，原产于北美洲，在分类学上隶属于鲈形目、太阳鱼科、黑鲈属。20世纪80年代从国外引进并取得养殖、繁殖的成功。大口黑鲈是一种肉质鲜美、无肌间刺、生长快、易起捕、适温较广的肉食性鱼类，逐渐成为名优养殖品种。2020年，我国大口黑鲈养殖产量达到61万吨。虽然大口黑鲈的养殖人工繁育取得了一定的进展和可喜的成绩，但是在过去的十多年里，大口黑鲈产业迅速发展，苗种需求量急剧上升，传统的育种手段已经不能满足市场需求，因此迫切需要良种繁育和品种改良来满足产业发展。

人工诱导鱼类雌核发育技术作为获得优良品种、加快种群选育、性别控制的有效手段，其核心技术包括精子遗传物质灭活与受精卵染色体加倍。精子遗传物质灭活与受精卵染色体加倍方法都有物理法和化学法，应用得较多的均为物理法，其中精子遗传物质灭活物理法中应用得较多的为紫外线法；受精卵的染色体加倍物理法中应用得较多的为冷休克法。大口黑鲈作为深受广大消费者喜爱的特色淡水鱼类，其消费需求日益增长，为满足广大消费者的需求优良品种的培育必不可少。目前大口黑鲈种质改良主要集中在群体选育及近缘杂交上，还未有利用雌核发育对大口黑鲈进行种质改良的报道。大口黑鲈人工诱导雌核发育技术的难点主要集中在一下几方面：第一，大口黑鲈卵子发育不同步，属于分批产卵的鱼类，雌鱼经人工催产后每次产卵的数量较少；第二，大口黑鲈雌鱼人工催产后的效应时间不固定，催产后2-15天都可能产卵；第三，大口黑鲈属于鲈形目、太阳鱼科、黑鲈属的鱼类，难以找到一种合适的异源精子对其进行雌核发育诱导，既能保证成功激活卵子发育，又能不产生杂交子代。

为此，针对改良大口黑鲈种质资源选择更适合的异源精子供体，并成功培育出生长速度快、肉质好的雌核发育大口黑鲈对其种质改良与生产实践有重大意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：

一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法

(1)选育II龄的雌性大口黑鲈和雄性翘嘴鳜作为亲鱼进行精养，然后进行人工催产获得雌性大口黑鲈成熟卵子和雄性翘嘴鳜精液；

(2)用预冷的培养皿收集步骤(1)后得到的翘嘴鳜精液，用预冷的Hank’s液稀释，得到的稀释精液放置于铺有冰板的摇床上，同时用40W紫外灯照射进行灭活处理5-10min，紫外灯与摇床的距离为18-20cm，显微镜观察灭活后的精子90％以上丧失运动能力即可；

(3)将步骤(2)灭活处理后得到的翘嘴鳜精液与所述步骤(1)后得到的大口黑鲈成熟卵子混合，平铺于盛有常温水的培养皿中受精2-3min，然后把培养皿中的常温水换成4℃的冷水进行冷处理10-15min，再把培养皿中的冷水换成常温水进行静水孵化，孵化出的正常鱼苗即雌核发育的大口黑鲈。