[发明专利]一种水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白及其编码基因、重组质粒载体、转化体和疫苗

说明书

本申请涉及基因工程的技术领域，具体公开了一种水痘‑带状疱疹病毒重组嵌合蛋白及其编码基因、重组质粒载体、转化体和疫苗。本申请公开了一种水痘‑带状疱疹病毒重组嵌合蛋白，该水痘‑带状疱疹病毒重组嵌合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。同时，本申请还公开了编码该水痘‑带状疱疹病毒重组嵌合蛋白的基因以及含有该基因的重组质粒载体、转化体和疫苗。本申请制备的水痘‑带状疱疹病毒重组嵌合蛋白具有较强的特异性和免疫原性。

技术领域

本申请涉及基因工程的技术领域，具体涉及一种水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白及其编码基因、重组质粒载体、转化体和疫苗。

背景技术

水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus，VZV)是引起水痘的病原体，儿童时初次感染诱发，随后潜伏于人体，当人体免疫力下降到一定阈值时，可再度激活引起水痘-带状疱疹病毒。据估计，每年约有100万例水痘-带状疱疹病毒；其中，特殊人群，如免疫功能低下的人患水痘-带状疱疹病毒的风险更大。大多数人一生中只发作一次水痘-带状疱疹病毒，然而，有些人会反复发病。因此，对于水痘-带状疱疹病毒疫苗的研发具有重要意义。

长期以来，美国在使用减毒的老年水痘-带状疱疹病毒疫苗Zostervax，该疫苗用于60岁以上的人群时，平均保护率只有约50％左右，且保护率随年龄的升高而降低；该疫苗用于80岁以上的人群时，平均保护率降至18％左右。2017年，重组水痘-带状疱疹病毒蛋白疫苗Shringrix成功上市，该疫苗用于50岁以上的人群时，平均保护率达90％以上，且保护效果受年龄影响较小；在80岁以上人群中仍有89.1％的保护率。

重组水痘-带状疱疹病毒蛋白疫苗Shringrix是利用水痘-带状疱疹病毒表面糖蛋白gE，并配合GSK自有佐剂AS01B制备得到的。其中，水痘-带状疱疹病毒糖蛋白gE由ORF68编码，有623个氨基酸，为I型跨膜糖蛋白，由信号肽、胞外区、跨膜区和胞内区几部分构成。研究发现，糖蛋白gE在感染细胞表面表达丰富，并兼有T、B细胞表位，是研究重组水痘-带状疱疹病毒疫苗的良好靶点。

目前，糖蛋白gE的研究多数集中于哺乳动物细胞表达，而哺乳动物细胞表达系统存在蛋白表达量低、糖基化不一致等问题。另外，研究者只截取糖蛋白gE的少部分氨基酸保守序列用于制备重组蛋白来研制疫苗，但因截取片段较小、涵盖表位较少，导致了重组蛋白的特异性和免疫原性较弱，从而限制了疫苗的应用。

发明内容

为了提供特异性和免疫原性较强的水痘-带状疱疹病毒重组蛋白，同时能够提高蛋白的表达量，本申请提供一种水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白及其编码基因、重组质粒载体、转化体和疫苗。

第一方面，本申请提供一种水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白，所述水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本申请利用如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，制备得到水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白，该重组嵌合蛋白具有较高的特异性和免疫原性。

第二方面，本申请提供了一种基因，所述基因为编码上述水痘-带状疱疹病毒重组嵌合蛋白的基因。

优选地，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

第三方面，本申请提供了上述基因的制备方法，具体包括以下步骤：

选取水痘-带状疱疹病毒糖蛋白氨基酸序列与破伤风毒素氨基酸序列进行连接，并优化为大肠杆菌偏爱密码子，设计并合成全长核苷酸序列，得到所述基因。

优选地，所述水痘-带状疱疹病毒糖蛋白氨基酸序列的选取位置为第31-537位对应的氨基酸序列。

优选地，所述破伤风毒素氨基酸序列为破伤风毒素表位P2对应的氨基酸序列。