[发明专利]宫颈癌相关的环状RNA标志物、检测试剂盒及方法在宫颈癌诊断中的应用

说明书

本发明公开了一种与宫颈癌相关的环状RNA标志物，其特征在于，所述的环状RNA标志物为环状RNA hsa_circ_0005571，所述环状RNA hsa_circ_0005571的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了基于该环状RNA hsa_circ_0005571的检测试剂盒及方法在宫颈癌诊断中的应用。本发明的环状RNA hsa_circ_0005571可作为宫颈癌检测的有效标志物。本发明的试剂盒及检测方法具有操作简单、灵敏性高、特异性强、周期短等特点，有利于宫颈癌的早期诊断和治疗，为后续研发对宫颈癌具有潜在治疗价值的新型药物提供帮助。

技术领域

本发明属于基因工程生物技术领域，特别是涉及一种宫颈癌相关的环状RNA标志物、检测试剂盒及方法在宫颈癌诊断中的应用。

背景技术

宫颈癌(Cervical Cancer，CC)是严重威胁女性健康的生殖系统恶性肿瘤，全球范围内其发病率和死亡率在女性恶性肿瘤中均居第四位。据估计，2018年全球有57万例宫颈癌新发病例，死亡病例超31万例。在发展中国家，宫颈癌是女性第二大常见恶性肿瘤；我国与印度的宫颈癌病例数约占全球总病例数的1/3。随着现代女性生活习惯的改变，生殖道病毒性疾病不断增加，性传播疾病普遍流行，使得宫颈癌发病年龄趋向于年轻化。

早期检测是防治宫颈癌的一种有效方法，通过早期检测与诊断，可及早采取有效手段干预处理，提高宫颈癌的生存率，极大改善患者预后。目前主要检测手段包括细胞学与HPV检测。细胞学包含传统巴氏涂片法及液基细胞学检查。传统巴氏涂片法检测费用较低，但是此技术准确性与灵敏度有限，医生阅片量大、主观性较强，由于取材和涂片过程中存在的问题造成漏诊或误诊情况较多。液基细胞学检查在制片方法上较传统涂片法更进步，但仍依赖于医生对细胞形态学的主观判断，缺少客观标准，易受主观因素影响及受制于取材质量而造成诊断结果不明确【HPV E6E7、宫颈液基细胞学、阴道镜活检在宫颈癌的筛查价值研究进展；中国妇产科临床杂志2022年5月第23卷第3期】。HPV分型检测，是基于对宫颈分泌物的HPV DNA进行鉴别。尽管具有较高的灵敏度，HPV检测却无法区分是否阳性的结果与临床病变相关联；较高的HPV感染率伴随着相对较低的宫颈癌发病率，仅有持续性HPV感染才和癌前病变密切联系。这可能带来异常过度诊断，造成女性不必要的焦虑。同时也提示在宫颈癌发生发展过程中存在个体间遗传差异等其他重要因素。因此，深入探究宫颈癌的确切发病机制，并寻找新型诊断标志物与潜在治疗靶点至关重要。

环状RNA(circularRNAs，circRNAs)是一类闭合环状的RNA分子，主要由mRNA前体(pre-mRNA)通过可变剪接方式加工产生。由于其结构中不具5’末端帽子和3’末端poly(A)尾巴、缺乏外切酶降解所需游离末端，因此circRNA比线性mRNA(linear RNA)更加稳定。现有研究表明，circRNA可通过充当微小RNA(miRNA)海绵或诱饵，与RNA结合蛋白相互作用，甚至翻译功能肽等方式，广泛参与肿瘤细胞增殖、分化、凋亡、侵袭转移等多种病理生理的调控。同时circRNAs具有内源性、丰富、保守、稳定等特点，且既可在癌症组织中特异表达，也存在于血液、血浆、细胞外囊泡、唾液、尿液中。CircRNAs的以上特性，表明了circRNAs作为诊断生物标志物和应用治疗的潜力。

近年研究证实，宫颈癌中也存在circRNAs的异常表达，提示其可能在宫颈癌的发生发展中起着重要作用，并有望作为新型肿瘤标志物或分子治疗靶点应用于临床。但总体而言，当前对circRNAs在宫颈癌中的研究仍不够全面与深入，circRNAs在宫颈癌中的分子机制仍处于基础研究阶段，对circRNAs是否可作为宫颈癌肿瘤诊断标志物等方面存在较大研究空间，仍需进一步证实。

发明内容

本发明的主要目的在于，针对现有技术中对circRNAs研究不够全面与深入、缺少宫颈癌诊断标志物的缺陷，本发明提供了一种宫颈癌相关的环状RNA标志物、检测试剂盒及方法在宫颈癌诊断中的应用。环状RNA hsa_circ_0005571经验证，可作为宫颈癌检测的有效标志物。