[发明专利]一种与骨关节炎相关的LncRNA标志物及其应用

说明书

本发明属于骨关节炎诊断、治疗和预后检测领域，具体公开了一种与骨关节炎相关的LncRNA标志物及其应用。所述LncRNA标志物HOXC‑AS3的基因序列如SEQ NO.3所示，扩增所述LncRNA标志物HOXC‑AS3的引物为HOXC‑AS3‑F：5’‑GTGGAGTAACAGCGCCATCT‑3’；HOXC‑AS3‑R：5’‑CGGGTTTTGTTGCGTCTTGT‑3’。通过研究表明，LncRNA HOXC‑AS3表达水平降低可以作为骨关节炎诊断、治疗和预后检测的生物标志物。

技术领域

本发明属于骨关节炎诊断、治疗和预后检测领域，涉及一种骨关节炎LncRNA标志物及其应用。

背景技术

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是活动关节的一种慢性进行性疾病，主要表现为关节软骨基质崩解、软骨细胞减少和活性降低等。中国骨关节炎诊治指南报道，骨关节炎在60岁以上的人群中患病率可达50％，75岁以上的人群中则达80％，致残率高达53％。因此，早期筛查诊断和防治骨关节炎对提高人们的生活质量具有重要意义。

LncRNAs是一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA分子，由于缺乏有效的开放阅读框，它们并不编码蛋白，而是以RNA的形式在表观遗传水平、转录及转录后水平等多种层面上调控基因的表达，从而影响疾病的发生与发展。随着高通量测序技术的发展，越来越多的LncRNAs被注释。因此，我们旨在探寻有效的LncRNA作为骨关节炎临床诊断、治疗和预后检测的标记物，从而提高骨关节炎患者的生活质量。

发明内容

本发明提供了一种与骨关节炎相关的LncRNA标志物HOXC-AS3及其应用，通过研究证明在骨关节炎关节软骨细胞中LncRNA HOXC-AS3的表达明显低于正常关节软骨细胞。具体讲，LncRNA HOXC-AS3的表达水平降低可以作为诊断骨关节炎发生及预后的生物标志物。

检测HOXC-AS3的物质在制备骨关节炎辅助诊断或预后评估试剂中的应用。作为本发明的一种优选，所述的检测HOXC-AS3的物质为HOXC-AS3的特异性引物、探针。

作为本发明的进一步优选，所述的HOXC-AS3的特异性引物如SEQ ID NO.1和SEQID NO.2所示。

一种骨关节炎辅助诊断或预后评估试剂，包含检测HOXC-AS3的物质。

作为本发明的一种优选，所述的检测HOXC-AS3的物质为HOXC-AS3的特异性引物、探针。

作为本发明的进一步优选，所述的HOXC-AS3的特异性引物如SEQ ID NO.1和SEQID NO.2所示。

HOXC-AS3或提高HOXC-AS3表达量的物质在制备骨关节炎治疗或辅助治疗药物中的应用。HOXC-AS3的核苷酸序列如SEQ NO.3所示。

有益效果：本发明发现了一种与骨关节炎相关的LncRNA标志物HOXC-AS3，该分子标志物在骨关节炎关节软骨细胞中的表达明显低于相应的正常关节软骨细胞，可以作为骨关节炎早期筛查、辅助查诊断或预后评估指标。本发明在细胞模型中发现与对照组相比，HOXC-AS3表达水平在OA细胞模型中显著降低(图5)，敲低HOXC-AS3后软骨细胞增殖能力下降(图7)，Edu阳性软骨细胞表达显著下降(图8)，软骨细胞被阻滞在G0/G1期(图9-10)，软骨细胞克隆形成能力降低(图11-12)；而过表达OXC-AS3后软骨细胞增殖能力(图14)和细胞克隆形成能力(图15-16)均增加。可见，HOXC-AS3可以作为OA的分子标记物，并应用于制备OA的诊断试剂盒或者成为治疗OA的候选药物。

附图说明

图1为基因测序分析正常关节软骨细胞和OA软骨细胞差异表达的基因。

图2为RT-qPCR检测临床正常关节软骨细胞和OA患者软骨细胞中LncHOXC-AS3的表达情况。