[发明专利]一种链霉菌菌株YP1及其应用

权利要求书

1.在一种链霉菌菌株YP1，其保藏号为CGMCC.23383。

2.根据权利要求1所述的链霉菌菌株YP1，其16S rRNA基因序列如SEQ ID NO .1所示。

3.根据权利要求2所述的链霉菌菌株YP1，扩增16S rRNA基因序列的PCR引物如SEQ IDNO .2和SEQ ID NO .3所示。

4.根据权利要求1、2或3所述的链霉菌菌株YP1，耐受0-5% w/v的NaCl。

5.一种权利要求1-4任意一项所述链霉菌菌株YP1在产榴菌素中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，包括以下步骤：

（1）平板培养：将菌株YP1划线于平板固体培养基上，于36-38℃恒温中培养1-3天；

（2）种子液培养：从平板培养基上挑取生长良好的YP1菌体，接入高温灭菌好的增殖培养基中，放入恒温摇床中培养1-3天，摇床转速为170-190r/min，培养温度为36-38℃；获得菌株YP1种子液；

（3）发酵培养：将菌株YP1种子液以4-6%v/v的接种量接入经高温灭菌的发酵培养基中，将发酵培养基置入恒温摇床中培养3-5天，摇床转速为170-190r/min，培养温度为36-38℃；获得蓝色的菌株YP1发酵液；

（4）对株YP1发酵液进行离心、旋蒸浓缩、纯化即得榴菌素；

平板培养基：琼脂20g、乳糖10g、胰蛋白胨5g、酵母浸粉10g、NacL 4g和蒸馏水1000 ml，pH＝7.0，121℃灭菌20 min；

增殖培养基：乳糖10g、胰蛋白胨5g、酵母浸粉10g、NacL 4g和蒸馏水1000ml，pH＝7.0，121 ℃灭菌20 min；

发酵培养基：乳糖10g、胰蛋白胨5g、酵母浸粉10g、NacL 4g和蒸馏水1000ml，pH＝7.0，121℃灭菌20 min。

7.根据权利要求6所述的应用，所述步骤（1）的培养条件为：37℃恒温中培养2天。

8.根据权利要求6所述的应用，所述步骤（2）的培养条件为：恒温摇床中培养2天，摇床转速为180r/min，培养温度为37℃。

9.根据权利要求6所述的应用，所述步骤（3）的培养条件为：恒温摇床中培养4天，摇床转速为180r/min，培养温度为37℃。

10.根据权利要求6、7、8或9所述的应用，所述纯化包括以下操作：

（1）用大孔吸附树脂纯化旋蒸浓缩获得的样品，选择乙醇—水体系进行冲洗，收集90%和100%浓度乙醇冲出的样品作为粗纯物A；

（2）将粗纯物A溶解到40%甲醇中，过滤后上半制备高效液相色谱仪，选择甲醇—水体系洗脱样品，收集60%甲醇冲出的样品即可；

所述%为质量百分数。