[发明专利]一种环磷腺苷的发酵制备方法

权利要求书

1.一种环磷腺苷的发酵制备方法，其特征在于，以节杆菌Arthrobacter sp.A302CGMCC No.3584为发酵菌株，通过在发酵培养基中添加微量元素，采用半连续发酵的方式制备环磷腺苷。

2.根据权利要求1所述的发酵制备方法，其特征在于，所述的微量元素包括Fe²⁺，Mn²⁺，Co²⁺，Cu²⁺，Zn²⁺，Mo⁶⁺，B³⁺，F^-中的任意一种或几种的组合；发酵培养基中，所述的微量元素总浓度为0.001g/L～1g/L。

3.根据权利要求1所述的发酵制备方法，其特征在于，所述的发酵培养基包括：葡萄糖5-50g/L、磷酸氢二钾2-20g/L、磷酸二氢钾2-20g/L、硫酸镁0.2-2g/L、蛋白胨1-10g/L、生物素0.001-0.01g/L、次黄嘌呤1-10g/L，微量元素0.001～1g/L，溶剂为水，pH 5-9。

4.根据权利要求1所述的发酵制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将节杆菌接种于含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵，待环磷腺苷增长稳定后，放出部分发酵液；

(2)向所述的发酵罐中添加新鲜发酵培养基至初始发酵培养基体积，继续发酵培养，待环磷腺苷增长稳定后，再次放出部分发酵液；

(3)重复步骤(2)2～20次。

5.根据权利要求4所述的发酵制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的节杆菌的接种量10％(v:v)。

6.根据权利要求4所述的发酵制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的发酵罐，其体积为20L～2T，发酵培养基占发酵罐体积的50％～80％。

7.根据权利要求4所述的发酵制备方法，其特征在于，所述的发酵，发酵温度为25-35℃，单批次发酵时间10～100h。

8.根据权利要求4或7所述的发酵制备方法，其特征在于，单批次发酵时间以以下因素确定：所述的环磷腺苷增长稳定为：6小时内环磷腺苷浓度提升幅度不超过0.5g/L。

9.根据权利要求4所述的发酵制备方法，其特征在于，所述的部分发酵液为发酵培养基体积的10％～90％。

10.根据权利要求4所述的发酵制备方法，其特征在于，重复次数以以下因素确定：环磷腺苷发酵浓度下降至首批次发酵结束时环磷腺苷浓度的80％以下。