[发明专利]有机溶剂耐受性提高的卤代烷脱卤酶DhaA突变体及其应用在审
| 申请号： | 202211032106.0 | 申请日： | 2022-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN115820598A | 公开（公告）日： | 2023-03-21 |
| 发明（设计）人： | 孙彦;吴垠;董晓燕;史清洪 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N9/14 | 分类号： | C12N9/14;C12N15/70;C12N15/55 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 王丽 |
| 地址： | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 有机溶剂 耐受 提高 卤代烷脱卤酶 dhaa 突变体 及其 应用 | ||
1.卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，包括：E16R/E257R，氨基酸序列SEQ ID NO.3；E121R/E257R，氨基酸序列SEQ ID NO.4；E16R/E93R/E257R，氨基酸序列SEQ ID NO.5；E16R/E121R/E257R，氨基酸序列SEQ ID NO.6；E93R/E121R/E257R，氨基酸序列SEQ ID NO.7；E16R/E93R/E121R/E257R，氨基酸序列SEQ ID NO.8。
2.如权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，E16R/E257R是以质粒pET28a-DhaA为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E257R；以质粒pET28a-DhaA-E257R为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E16R/E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E16R/E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E16R/E257R。
3.如权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，E121R/E257R是以质粒pET28a-DhaA-E257R为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E121R/E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E121R/E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E121R/E257R。
4.如权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，E16R/E93R/E257R是以质粒pET28a-DhaA-E16R/E257R为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E16R/E93R/E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E16R/E93R/E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E16R/E93R/E257R。
5.如权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，E16R/E121R/E257R是以质粒pET28a-DhaA-E16R/E257R为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E16R/E121R/E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E16R/E121R/E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E16R/E121R/E257R。
6.如权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，E93R/E121R/E257R是以质粒pET28a-DhaA-E121R/E257R为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E93R/E121R/E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E93R/E121R/E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E93R/E121R/E257R。
7.如权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体，其特征是，E16R/E93R/E121R/E257R是以质粒pET28a-DhaA-E93R/E121R/E257R为模板进行PCR扩增，得到质粒pET28a-DhaA-E16R/E93R/E121R/E257R；将上述质粒pET28a-DhaA-E16R/E93R/E121R/E257R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，得到卤代烷脱卤酶DhaA突变体E16R/E93R/E121R/E257R。
8.权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体应用于提高有机溶剂半衰期。
9.权利要求1的卤代烷脱卤酶DhaA突变体应用于提高有机溶剂耐受性。
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