[发明专利]高效表达5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株的构建方法

说明书

本发明涉及5‑氨基乙酰丙酸的构建技术领域，且公开了高效表达5‑氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株的构建方法，解决了目前5‑氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株构建时搅拌混合装置单一方向搅拌，物料运动性能较差，搅拌混合时间较长，进而导致工作效率较低的问题，其包括基座，所述基座上端对称连接有支撑板，支撑板内侧转动连接有摆动架，摆动架上端中部嵌装有工型轴，本发明通过摇摆电机驱动主动锥齿轮与从动锥齿轮啮合传动，使得下压凸块与顶杆圆周活动接触，进而台型块能够左右摆动，使得第一转轴带动摆动架左右摆动，进而混合筒左右摆动，再与搅拌机构的配合，能够使内部物料被激荡产生更加剧烈的运动，从而提高混合效率。

技术领域

本发明属于5-氨基乙酰丙酸的构建技术领域，具体为高效表达5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株的构建方法。

背景技术

5-氨基乙酰丙酸(ALA)广泛存在于动植物和微生物细胞中，它是所有吡咯化合物包括细胞色素、亚铁血红素、维生素B12叶绿素等的前体物，在生物体的代谢中非常重要，在农业上常用于植物生长调节剂、绿色除草剂、杀虫剂；在医学领域，作为一种新型光动力药物，不仅用于局部或全身的皮肤癌的治疗，还可用于膀胱癌、消化道癌、肺癌等的诊断。

自然界中，ALA的生物合成存在两条途径，一条是C4途径，由5-氨基乙酰丙酸合成酶(ALAS，hemA编码)催化琥珀酰-CoA和甘氨酸生成ALA的一步酶促反应组成，主要存在于一些光合细菌、真菌以及动物体内。另外一条是C5途径，首先谷氨酸在谷氨酰-tRNA合成酶(GluRS，gltX编码)催化下，生成谷氨酰-tRNA，然后，谷氨酰-tRNA在谷氨酰-tRNA还原酶(GluTR，hemA编码)作用下生成谷氨酸-1-半醛(GSA)，最后GSA由谷氨酸-1-半醛-2,1-氨基转移酶(GSA-AM，hemL编码)催化生成ALA。该途径广泛存在于植物、藻类以及细菌(如大肠杆菌)中。

在5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株构建时，需要将原料进行混合处理，现有的原料混合设备在进行搅拌混合时，物料通过搅拌轴单向旋转方式进行搅拌，这样的方式，其内部的物料朝单一方向旋转运动，运动性能较差，搅拌混合时间较长，进而导致工作效率较低。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明提供高效表达5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株的构建方法，有效的解决了目前5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株构建时搅拌混合装置单一方向搅拌，物料运动性能较差，搅拌混合时间较长，进而导致工作效率较低的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：高效表达5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌株的构建方法，包括基座，所述基座上端对称连接有支撑板，支撑板内侧转动连接有摆动架，摆动架上端中部嵌装有工型轴，工型轴与摆动架转动连接，工型轴下端固定连接有混合筒，混合筒内部连接有搅拌机构，基座一侧连接有摆动传动组件；

摆动传动组件包括与基座连接的底板，底板上端一侧连接有门型架，门型架上端中部嵌装有支撑块，支撑块一侧开设有调节槽，调节槽内部转动连接有螺杆，螺杆上端连接有手柄，螺杆外部螺纹套设有调节块。

优选的，所述门型架上部一侧连接有横杆，横杆一端连接有连接板，连接板一侧连接有支撑架，支撑架下端与底板连接。

优选的，所述支撑架内部通过传动轴转动连接有主动锥齿轮，传动轴一端延伸至支撑架一侧连接有摇摆电机。

优选的，所述主动锥齿轮下端啮合连接有从动锥齿轮，从动锥齿轮上端中部固定连接有连接轴，连接轴上端与连接板转动连接，从动锥齿轮下端两侧对称连接有下压导块。

优选的，所述摆动传动组件还包括与其中一个支撑板转动连接的第一转轴，第一转轴一端与摆动架固定套接，第一转轴另一端延长段固定连接有台型块，台型块上端两侧均连接有顶杆，顶杆与下压导块活动接触。