[发明专利]产OPO型结构酯的基因工程菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种产OPO型结构酯的基因工程菌，其为含有编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9-2基因的重组酵母细胞。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为经过底盘改造的重组酵母细胞；优选地，所述底盘改造包括C16:1的合成代谢途径的抑制；进一步优选地，所述C16:1的合成代谢途径的抑制为编码Δ9去饱和酶的OLE1基因的敲除。

3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中的编码Δ9去饱和酶的OLE1基因被编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9-2基因替代。

4.根据权利要求2或3所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为经过脂质或脂质前体合成途径的优化的重组酵母细胞；优选地，所述脂质或脂质前体合成途径的优化包括在重组酵母细胞中过表达编码甘油-3-磷酸酰基转移酶的GAT1基因、编码磷脂酸酰基转移酶的SLC基因、编码磷脂酸磷酸酶的PAP基因和编码二酰甘油酰基转移酶的DGAT基因中的一种或几种；进一步优选地，所述脂质或脂质前体为甘油三酯或脂肪酸；更进一步优选地，所述脂肪酸包括C16:0、C16:1、C18:0、C18:1中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，

所述脂质或脂质前体合成途径的优化为在重组酵母细胞中过表达编码甘油-3-磷酸酰基转移酶的GAT1基因或编码磷脂酸酰基转移酶的SLC基因或编码磷脂酸磷酸酶的PAP基因或编码二酰甘油酰基转移酶的DGAT基因；

或者，所述脂质或脂质前体合成途径的优化为在重组酵母细胞中过表达编码磷脂酸酰基转移酶的SLC基因和编码磷脂酸磷酸酶的PAP基因；

或者，所述脂质或脂质前体合成途径的优化为在重组酵母细胞中过表达编码甘油-3-磷酸酰基转移酶的GAT1基因、编码磷脂酸酰基转移酶的SLC基因和编码磷脂酸磷酸酶的PAP基因；

或者，所述脂质或脂质前体合成途径的优化为在重组酵母细胞中过表达编码甘油-3-磷酸酰基转移酶的GAT1基因、编码磷脂酸酰基转移酶的SLC基因、编码磷脂酸磷酸酶的PAP基因和编码二酰甘油酰基转移酶的DGAT基因。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的重组酵母细胞，其特征在于，所述酵母细胞选自由以下酵母细胞构成的组：解脂耶氏酵母、红冬孢酵母、油脂酵母、产油油脂酵母、胶粘红酵母、弯曲隐球酵母、弯曲假丝酵母、发酵丝孢酵母、拉考夫假丝酵母、铁红假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、皮状丝孢酵母和酿酒酵母，优选为酿酒酵母。

7.一种如权利要求1-6中任意一项所述的基因工程菌的构建方法，其包括：

步骤(A)，构建含有编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9-2基因的重组酵母细胞A；

步骤(Z)，优化脂质或脂质前体合成途径。

8.根据权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(A)包括：

步骤M，在酵母细胞中表达编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9-2基因；

步骤N，从酵母细胞中敲除编码Δ9去饱和酶的OLE1基因；

优选地，所述步骤(A)包括以编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9-2基因替代编码Δ9去饱和酶的OLE1基因，构建含有编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9-2基因的重组酵母细胞A。