[发明专利]多塞平血药浓度检测方法

权利要求书

1.一种多塞平血药浓度检测方法，采用二维液相色谱仪系统，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备溶液

所述溶液包括由正常人空白血清制得的空白血清溶液、含有多塞平的标准溶液、混合有多塞平和正常人空白血清的系统适用性溶液、由正在进行多塞平治疗的患者的血清制得的供试品溶液；

S2、设置色谱参数

在所述二维液相色谱仪系统上设置一维柱色谱条件的参数、二维柱色谱条件的参数、大体积进样条件的参数和阀切换条件的参数，并使用所述空白血清溶液和所述系统适用性溶液确认，其中

所述一维柱色谱条件的参数为：

一维柱是填充剂为亲水性聚氧乙烯和疏水基的苯基以一定比例键合的固相萃取柱；

一维洗脱液包括一维流动相A和一维流动相B，所述一维流动相A为甲醇，所述一维流动相B为水；

一维洗脱方式为梯度洗脱；

所述二维柱色谱条件的参数为：

二维柱是填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱；

二维洗脱液包括二维流动相A和二维流动相B，所述二维流动相A为乙腈，所述二维流动相B为0.025mol/L的磷酸二氢钾溶液；

二维洗脱方式为等度洗脱；

S3、实施检测

将所述供试品溶液和不同体积的所述标准溶液分别注入所述二维液相色谱仪系统，并记录典型谱图；

S4、定量分析

分析得到不同质量浓度下的多塞平各自对应的多塞平图谱的峰面积，绘制多塞平的标准曲线，分析得到供试品溶液对应的多塞平的峰面积，计算得到供试品溶液中多塞平的含量。

2.根据权利要求1中所述的多塞平血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维流动相A甲醇在一维洗脱液中的体积占比不低于10％且不高于90％。

3.根据权利要求2中所述的多塞平血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维洗脱液以0.3mL/min-1.7mL/min的流速流经温度范围为20℃-35℃的所述一维柱，以富集纯化样品中的多塞平。

4.根据权利要求3中所述的多塞平血药浓度检测方法，其特征在于，所述一维洗脱液的梯度洗脱程序为：

0min-3min，流速为0.3mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比为1：9；

3min-5min，流速升高至1.7mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；

5min-5.1min，流速维持在1.7mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比变为9：1；

5.1min-9min，流速维持在1.7mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在9:1；

9min-9.1min，流速维持在1.7mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比变为1：9；

9.1min-11min，流速维持在1.7mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；

11min-11.1min，流速降低至0.3mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9；

11.1min-13min，流速维持在0.3mL/min，一维流动相A甲醇：一维流动相B水的体积比维持在1：9。

5.根据权利要求4中所述的多塞平血药浓度检测方法，其特征在于，在一维洗脱时，为一维洗脱液注入水进行稀释，注水稀释程序为：0min-3min，水的流速为1.2mL/min；3min-3.1min，水的流速下降至0.01mL/min；3.1min-11min，水的流速保持在0.01mL/min；11min-11.1min，水的流速上升至1.2mL/min；11.1min-13min，水的流速保持在1.2mL/min。

6.根据权利要求1中所述的多塞平血药浓度检测方法，其特征在于，所述二维洗脱液以0.5mL/min-1.0mL/min的流速流经温度范围为20-35℃的所述二维柱，以分离和定量分析多塞平。