[发明专利]一种从连翘叶中提取连翘酯苷B的方法

说明书

本发明提供一种从连翘叶中提取连翘酯苷B的方法，本发明利用了采用大孔树脂获得连翘苷和连翘酯苷A的过程中的副产物，即水洗脱部分和低浓度乙醇洗脱部分来提取连翘酯苷B，再利用甲醇‑水和乙腈‑水两种反相层析系统对目标成分和杂质成分的分离度的不同进一步纯化，即可得到高纯度的连翘酯苷B。本发明利用了采用大孔树脂获得连翘苷和连翘酯苷A的过程中的副产物来提取连翘酯苷B，充分利用了连翘叶资源；并且所使用的反相硅胶填料和溶剂等可重复利用，为大量制备高纯度连翘酯苷B提供了一种经济易行的方法。

技术领域

本发明属于植物化学分离技术领域，涉及一种从连翘叶中提取连翘酯苷B的方法。

背景技术

连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl为木犀科连翘属植物，药典规定药用部位是其干燥果实，为中医常用的清热解毒药。

研究表明，连翘叶中除含有大量连翘苷和连翘酯苷A等活性成分，同时也含有属于苯乙醇苷类化合物的连翘酯苷B(forsythiaside B，CAS 81525-13-5)，其结构式如下所示，药理研究表明，其具有抗炎、抑菌、抗病毒和抗氧化及治疗或预防心血管疾病等多种药理作用，具有广泛的应用前景。

传统上连翘酯苷B的基源植物为中药材广东紫珠Callicarpa kwuang-tungensisChun，也是中国药典规定的广东紫珠的指标性成分之一。近年来也有从独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo中制备连翘酯苷B的报道和专利，如中国专利200910016543.1，201310305644.7。

由于中药材化学成分的组成和含量比例的特殊性，前述从广东紫珠和独一味中提取连翘酯苷B的方法并不适用于连翘叶原料，这是由于连翘酯苷B在连翘叶中的含量较低，杂质成分相对较多，分离纯化难度更大，单一的采用反相填料吸附，甲醇-水系统洗脱纯化方法难以获得较高纯度的连翘酯苷B单体。

关于从连翘叶中提取连翘酯素、连翘苷、连翘酯苷A等天然产物的方法已有相关文献和专利报道，如中国专利201910048775.9，201310052192.6，201110209731.3，但上述报道均未包括从连翘叶中提取连翘酯苷B的方法，部分原因是因为连翘叶中以连翘苷和连翘酯苷A为主要成分，连翘酯苷B的含量相对较低，且因其极性较大，主要存在于水和低浓度有机溶剂除杂过程的洗脱液中，不易被关注和利用；另外，由于上述洗脱部分成分复杂，难以分离和纯化，因此前述相关专利中的纯化方法也不适用于连翘叶中连翘酯苷B的分离和纯化。

发明内容

为了解决上述现有技术的问题，本发明提供一种从连翘叶中提取连翘酯苷B的方法，可得到高纯度的连翘酯苷B。

本发明通过以下技术方案实现：

一种从连翘叶中提取连翘酯苷B的方法，包括如下步骤：

(1)连翘叶提取液的制备

将连翘叶粉碎，采用甲醇溶液热回流提取，浓缩去除甲醇，并用水稀释，然后分离得连翘叶提取液；

(2)连翘酯苷B的分离

一次分离：将所得连翘叶提取液采用大孔树脂进行吸附分离，先用水洗脱，收集含连翘酯苷B的水洗脱液，再用10％-20％乙醇洗脱，收集含连翘酯苷B的乙醇洗脱液，合并含连翘酯苷B的水洗脱液和乙醇洗脱液，去除乙醇，得含连翘酯苷B的一次分离液；

二次分离：将含连翘酯苷B的一次分离液采用大孔树脂吸附分离，先用水洗脱，再用50％～75％乙醇洗脱，收集含连翘酯苷B的乙醇洗脱液，去除乙醇，得连翘酯苷B粗品；

(3)连翘酯苷B的纯化