[发明专利]在亲和层析中减少宿主细胞蛋白的方法

权利要求书

1.低电导率水溶液在蛋白A层析的洗涤步骤中降低宿主细胞蛋白的含量的用途，其中蛋白A层析用于纯化人IgG4或IgG1同种型抗体，其中低电导率水溶液具有约0.5mS/cm或更小的电导率值。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述宿主细胞蛋白是磷脂酶B样2(PLBL2)或簇蛋白。

3.根据权利要求1至2中任一项所述的用途，其中所述低电导率水溶液包含约0.1mM至约8mM Tris。

4.根据权利要求1至2中任一项所述的用途，其中所述低电导率水溶液包含约0.05mM至约2mM磷酸钾。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其中所述低电导率水溶液具有约7或更高的pH。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的用途，其中所述低电导率水溶液洗涤步骤之前或之后是高电导率水溶液洗涤步骤。

7.根据权利要求6所述的用途，其中所述高电导率水溶液具有约20mS/cm或更高的电导率值。

8.根据权利要求6至7中任一项所述的用途，其中所述高电导率水溶液包含组氨酸。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其中所述人IgG4同种型抗体是针对P-选择蛋白的抗体或针对因子IXa和因子X的抗体或针对IL-13的抗体或针对β淀粉状蛋白的抗体。

10.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其中所述人IgG1同种型抗体是针对乙型流感的抗体或针对VEGF-A的抗体或针对CD22的抗体或针对HER3和EGFR的双特异性抗体或针对β淀粉状蛋白的抗体或针对Her2的抗体或针对Ang2和VEGF-A的双特异性抗体或针对癌胚抗原(CEA)和CD3的双特异性抗体。

11.产生人IgG4或IgG1同种型抗体的方法，包括以下步骤：

a)培养包含编码人IgG4或IgG1同种型抗体的核酸的细胞，

b)从细胞或培养基中回收人IgG4或IgG1同种型抗体，

c)使人IgG4或IgG1同种型抗体与蛋白A层析材料接触，

d)用低电导率水溶液洗涤蛋白A层析材料，其中所述低电导率水溶液具有约0.5mS/cm或更小的电导率值，

e)从蛋白A层析材料中回收人IgG4或IgG1同种型抗体，

从而产生人IgG4或IgG1同种型抗体。

12.从样品中纯化人IgG4或IgG1同种型抗体的方法，包括以下步骤：

a)提供包含人IgG4或IgG1同种型抗体的样品，

b)用蛋白A层析法/步骤纯化人IgG4或IgG1同种型抗体，包括用低电导率水溶液洗涤蛋白A层析材料，其中所述低电导率水溶液具有约0.5mS/cm或更小的电导率值。

13.根据权利要求11至12中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞蛋白的量减少，并且其中所述宿主细胞蛋白是磷脂酶B样2(PLBL2)或簇蛋白。

14.根据权利要求11至13中任一项所述的方法，其中所述低电导率水溶液包含约0.1mM至约8mM Tris。

15.根据权利要求11至14中任一项所述的方法，其中所述低电导率水溶液包含约0.05mM至约2mM磷酸钾。

16.根据权利要求11至15中任一项所述的方法，其中所述低电导率水溶液具有约7或更高的pH。