[发明专利]一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制作方法及其应用

权利要求书

1.一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，通过碱提取法从人体头发中制备出头发纳米颗粒，并通过挤推法得到巨噬细胞膜，之后用超声融合法让巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒，得到一种巨噬细胞膜包裹的头发纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，以质量比2：1的比例取头发纳米颗粒与巨噬细胞膜进行融合，超声水浴将头发纳米颗粒包裹入巨噬细胞膜中。

3.根据权利要求2所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，超声水浴条件为220W,冰水浴20分钟。

4.根据权利要求1所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述头发纳米颗粒和巨噬细胞膜的粒径均小于100nm。

5.根据权利要求1所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，头发纳米颗粒的制备过程包括：将人体头发加入加热后的碱性溶液中搅拌至完全溶解，再依次经过透析、搅拌、离心、蒸干和超声的过程后，得到所述的头发纳米颗粒。

6.根据权利要求5所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述加热后的碱性溶液温度为80℃，碱性溶液为1M NaOH溶液，搅拌时间为5分钟；透析条件为7000kD分子量截留，1×PBS溶液中透析24小时；搅拌条件为在磁力搅拌器中100rpm/min转速，室温搅拌1.5小时；离心条件为2000rpm/min离心6分钟后取上清，将上清12000rpm/min离心10分钟后取黑色沉淀，用ddH₂O溶液清洗后再次重复12000rpm/min离心2次，每次10分钟；超声条件为，用520W功率的超声探头在冰水浴中震碎头发微米颗粒1小时，条件为超声开3秒，停1秒。

7.根据权利要求6所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，巨噬细胞膜的制备过程包括：取小鼠巨噬细胞系RAW 264.7进行培养，消化下来后得到细胞沉淀；用含有1mM苯甲基磺酰氟(PMSF)的RIPA裂解液(强)冰上裂解细胞沉淀，随后用45W功率的超声探头在冰水浴中震碎溶液；之后取超声后的溶液4℃条件下离心，取上清保存；将所取上清加入含有1mM PMSF的RIPA裂解液(强)，送入超速离心管，超速离心后弃上清，保留沉淀，并用1×PBS吹打均匀该沉淀得到巨噬细胞膜溶液；将巨噬细胞膜溶液通过Avantis挤推器连续挤推，得到呈囊泡形态的巨噬细胞膜溶液(RAWM)，并进行蛋白定量，明确溶液浓度。

8.根据权利要求7所述的一种巨噬细胞膜包裹头发纳米颗粒的制备方法，其特征在于，用45W功率的超声探头在冰水浴中震碎溶液30分钟，条件为超声开2秒，停3秒；超声后的离心条件为20000rpm/min离心20分钟去除细胞核；超速离心条件为100000g/min，4℃离心45分钟；Avantis挤推器的挤推孔径为400nm，挤推次数为11次。

9.一种基于权利要求1-8任一项所述方法制备的巨噬细胞膜包裹的头发纳米颗粒。

10.一种基于权利要求9所述巨噬细胞膜包裹的头发纳米颗粒在制备治疗糖尿病足溃疡伴感染的药物中的应用。