[发明专利]一种RNA甲基化转移酶METTL7B及用途

说明书

本发明公开了一种RNA甲基化转移酶METTL7B及用途。本发明所要保护的一个技术方案是蛋白质在制备RNA甲基化转移酶或RNA甲基化转移酶制剂中的应用，所述蛋白质的氨基酸序列可为序列表中序列1、序列3或序列5。本发明针对RNA甲基化转移酶METTL7B的活性，建立了基于生物发光法的RNA甲基化修饰的表征方法，所述方法通过检测发光信号判断不同RNA序列是否被METTL7B所修饰，实现了在不同条件下检测RNA甲基化修饰酶METTL7B的RNA甲基化活性。所述方法在筛选及评价靶向RNA甲基化修饰酶METTL7B不同类别的RNA修饰活性的抑制剂或激动剂，以及治疗相关疾病的药物中具有应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种RNA甲基化转移酶METTL7B及用途。

背景技术

表观遗传修饰在细胞命运和疾病发生过程中起重要作用。RNA甲基转移酶通过改变RNA的表观修饰来影响细胞功能和生理学的变化以及调节RNA甲基化状态。

N6-腺嘌呤甲基化(m6A)修饰，即RNA的腺嘌呤第六位氮原子的甲基化修饰，是现今发现最为丰富的RNA修饰。RNA m6A修饰广泛分布在基因转录组，每2000个碱基中存在一个m6A修饰位点，即平均每一条mRNA或非编码RNA就含有3-5个m6A修饰。进一步的研究发现m6A存在保守序列RRACH(R＝G,A；H＝A,C,U),主要集中在RNA的终止密码子、3’UTR以及长外显子附近。因此，m6A甲基化修饰参与RNA的编辑、代谢、翻译、稳定性等重要调控过程。m6A甲基化的基因调控网络十分庞大，包括甲基化转移酶(Writer)、去甲基化酶(Erasers)和甲基化阅读蛋白(Readers)三者共同参与和调控。“书写器”(Writer)主要负责将甲基化修饰“写入”目标RNA，在S-腺苷甲硫氨酸(s-adenosyl methionine，SAM)做为甲基供体的情况下，与含有RRACH序列的底物RNA结合，将甲基转移到A上，最终催化成m6A，介导RNA甲基化修饰过程的发生。去甲基化酶(Erasers)主要包括FTO和ALKBH5，其主要行使“擦除”m6A RNA甲基化修饰信号的过程。阅读蛋白(Readers)则是负责“读取”m6A RNA甲基化修饰的信息，它们是含有YTH家族的蛋白和胰岛素样生长因子结合蛋白(IGF2BP1,2,3)，参与RNA翻译和维持稳定性的过程。RNA的m6A甲基化过程是由“Writer”“Eraser”“Reader”一个或多个共同完成的。因此，m6A甲基化相关蛋白组成了一个庞大的基因调控网络，在RNA生物过程上发挥极为重要的作用，但由于其复杂性，其参与者以及调控机制仍有待被发掘。

METTL7B是(Methyltransferase like 7B)甲基化转移酶样家族成员之一，其蛋白结构包含一个S-腺苷基甲硫氨酸结合域(S-adenosylmethionine binding site,SAMbinding site)。METTL7B参与多种恶性肿瘤的侵袭及迁移的调控。METTL7B参与乳腺癌细胞的基因组稳定性和肿瘤侵袭。METTL7B是否参与RNA甲基化修饰调控，以及检测其RNA甲基化修饰的方法仍然缺乏。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何检测甲基化转移酶样蛋白是否参与RNA甲基化修饰和/或如何制备RNA甲基化转移酶和/或如何制备RNA甲基化转移酶制剂和/或如何在体外对RNA进行甲基化修饰。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了蛋白质在制备RNA甲基化转移酶或RNA甲基化转移酶制剂中的应用，所述蛋白质为如下的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；

A2)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白质；

A3)氨基酸序列是序列表中序列5的蛋白质；

A4)氨基酸序列是序列表中序列1的第24-244位的蛋白质；

A5)在A1)或A2)或A3)或A4)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；