[发明专利]一种用于强化淀粉类食品的多维生素检测方法

说明书

本发明公开了一种用于强化淀粉类食品的多维生素检测方法，包括以下步骤1)酶解；2)样品提取；3)色谱分析；4)样品定性分析；5)样品定量分析，标准溶液配制，以标样响应峰面积作为纵坐标，标样浓度为横坐标，采用外标法定量，建立标准工作液的标准曲线，对标准工作液和样液等体积参插进样，测定标准工作液和样液中维生素响应值均在仪器检测的线性范围内。本发明采用合适的样品酶解方法，通过一个前处理方法实现，减少前处理时间并减少了维生素的损失，可准确快速的进行大批量样品的检测；优化流动相、梯度洗脱程序，使得这些化合物可以一次性实现分离和定量，减少了不同体系流动相的配制，改善了易丢峰、鬼峰、分叉峰、拖尾峰的现象。

技术领域

本发明属于检测领域，尤其是涉及一种用于强化淀粉类食品的多维生素检测方法。

背景技术

随着经济水平的逐渐提升，人们对食品的需求逐渐从“吃得放心”转化为“吃得营养”。营养强化淀粉类食品作为营养强化食品，如营养强化米粉，营养强化面条等发展迅速，人们越来越关注其营养成分，然营养素检出不合格的情况较多。水溶性维生素B1、B2、B3(烟酸、烟酰胺)、B6(吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺)等作为重要的营养成分，对其检测具有重要意义。

目前，针对水溶性维生素的国家标准检测方法多为单一维生素的检测，前处理步骤繁琐，不易操作，检测周期长。多种水溶性维生素同时检测的研究方法主要为液相色谱串联质谱法和液相色谱法。液相色谱串联质谱法，仪器价格昂贵、操作难度较大、维护成本高、一般实验室难以配备，不易普及。高效液相色谱法则主要采用紫外检测器进行检测，部分维生素检出限较高，干扰严重。研究的样品基质以奶粉和保健食品居多，且对于维生素B6的测定多只检测其中的一种，而Yaman M等的研究表明，淀粉类食品中含有吡哆醛、吡哆醇和吡哆胺形式的维生素B6。维生素B1、B2、B3(烟酸、烟酰胺)、B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)作为强化类食品的重要组成部分，其在营养强化淀粉类食品中同时检测的方法并未见报道。

在实际强化淀粉类样品检测中，由于维生素具有不稳定性且强化淀粉类食品中水溶性维生素的检测需要经过酶解过程，如何保证酶解过程高效且尽可能降低维生素损失是获得准确检测方法的重点，然目前未见相关研究。同时由于不同维生素的化学性质有区别，如何改善提取液、流动相、梯度洗脱条件、结合检测器的优势，以实现同一体系检测，高效、准确、高灵敏度、低干扰、高通量是方法建立的需要突破的重点，目前针对强化淀粉类食品中多种水溶性维生素的相关研究尚匮乏。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种可以同时检测强化淀粉类食品中7种水溶性维生素，检测速度快的用于强化淀粉类食品的多维生素检测方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用于强化淀粉类食品的多维生素检测方法，包括以下步骤：

1)酶解，将样品，BHT，α-淀粉酶，一级水按质量比10:1:1:80混合，并在45～70℃水浴中振荡酶解15～90min；

2)样品提取，取步骤1)获得的酶解液，调节pH至1.6～1.8，放置1.5～3min后，调节pH至4.4～4.6，充分混合后，超声提取8～12min，转移定容至100mL容量瓶，过0.22μm水膜，上机；

3)色谱分析，将步骤2)获得的上机液经高效液相色谱-二极管阵列检测器串联荧光检测器联用法测定，其中色谱柱：安捷伦ZORBAX Eclipse XDB C18(250mm×4.6mm×5μm)；柱温35℃；流动相：A相，十二烷基硫酸钠溶液，B相，乙腈；梯度洗脱条件：0～5.0min，B相：10％；5.0min～20min，B相：10％～62％；20.1～25.0min，B相62％～10％；25.1～28.0min，B相10％，后续程序增加平衡时间5min；流速：1mL/min；进样量：10μL；检测器为DAD串联FLD，DAD检测波长为261nm，245nm，荧光检测器：0～10.0min，激发波长462nm，发射波长522nm，10.0～28.0min，激发波长293nm，发射波长462nm；