[发明专利]双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶编码基因folD在L-氨基酸合成中的应用

权利要求书

1.蛋白质，其特征在于，所述蛋白质为下述任一种：

A1)氨基酸序列是SEQ ID No.5的蛋白质；

A2)将SEQ ID No.5所示的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。

2.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为下述任一种：

B1)编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子；

B2)编码序列是SEQ ID No.4所示的DNA分子；

B3)核苷酸序列是SEQ ID No.4所示的DNA分子。

3.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：

C1)含有权利要求2所述核酸分子的表达盒；

C2)含有权利要求2所述核酸分子的重组载体、或含有C1)所述表达盒的重组载体；

C3)含有权利要求2所述核酸分子的重组微生物、或含有C1)所述表达盒的重组微生物、或含有C2)所述重组载体的重组微生物；

C4)含有权利要求2所述核酸分子的重组细胞、或含有C1)所述表达盒的重组细胞、或含有C2)所述重组载体的重组细胞。

4.D1)-D10)中任一项在构建产L-氨基酸的基因工程菌中的应用，和/或，在制备L-氨基酸中的应用，和/或，在调控微生物L-氨基酸的产量中的应用，其中所述D1)-D10)为：

D1)权利要求1所述的蛋白质；

D2)权利要求2所述的核酸分子；

D3)权利要求3所述的生物材料；

D4)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；

D5)编码SEQ ID No.2所示蛋白质的DNA分子；

D6)核苷酸序列或编码序列为SEQ ID No.1的DNA分子；

D7)含有D5)或D6)中所述DNA分子的表达盒；

D8)含有D5)或D6)中所述DNA分子的重组载体、或含有D7)所述表达盒的重组载体；

D9)含有D5)或D6)中所述DNA分子的重组微生物、或含有D7)所述表达盒的重组微生物、或含有D8)所述重组载体的重组微生物；

D10)含有D5)或D6)中所述DNA分子的重组细胞、或含有D7)所述表达盒的重组细胞、或含有D8)所述重组载体的重组细胞。

5.一种提高微生物L-氨基酸的产量的方法，其特征在于，所述方法包括下述任一种：

E1)提高目的微生物中的权利要求2所述核酸分子的表达量或含量，得到L-氨基酸的产量高于所述目的微生物的微生物；

E2)提高目的微生物中的权利要求4中D5)或D6)所述DNA分子的表达量或含量，得到L-氨基酸的产量高于所述目的微生物的微生物；

E3)对所述目的微生物中的核苷酸序列为SEQ ID No.1的DNA分子进行突变，得到L-氨基酸的产量高于所述目的微生物的微生物，所述突变为将SEQ ID No.1所示DNA分子编码的氨基酸序列的第36位的亮氨酸残基突变为另一种氨基酸残基。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述突变为将SEQ ID No.1所示DNA分子编码的氨基酸序列的第36位的亮氨酸残基突变为谷氨酰胺残基。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述突变是将SEQ ID No.1所示DNA分子中第107位的核苷酸T突变为A。