[发明专利]高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法

权利要求书

1.高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，具体包括如下步骤：

1）系统适用性溶液的配制：取精氨酸培哚普利及其立体异构体混合对照品适量，用混合溶剂制成每1ml中含精氨酸培哚普利2mg及精氨酸培哚普利立体异构体0.01mg的溶液，作为系统适用性溶液；

2）供试品溶液的配制：取待测精氨酸培哚普利20mg，用混合溶剂制成每1ml中含2mg精氨酸培哚普利的溶液，作为供试品溶液；

3）对照溶液的配制：精密量取供试品溶液1ml，用混合溶剂制成每1ml中含0.01mg供试品的溶液，作为对照溶液；

4）异构体的液相色谱检测：取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，当色谱图中立体异构体色谱峰及主峰的相互分离度均大于1.5时，再精密量取对照溶液和供试品溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；

其特征在于：所述步骤4）液相色谱检测采用的流动相为氨基酸络合物-甲醇溶液，其中氨基酸络合物和甲醇的质量比为95:5～5:95。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，其特征在于：所述氨基酸络合物为氨基酸-铜盐络合物，具体包括L-半胱氨酸、L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、L-亮氨酸、L-酪氨酸、L-组氨酸与硫酸铜、氯化铜、乙酸铜、硝酸铜中的一种或多种经溶解后混合组成，其浓度为20～50mmol/L。

3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，其特征在于：所述步骤1）~3）中的混合溶剂为质量比50:50的乙醇-水溶液。

4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，其特征在于：所述步骤4）中液相色谱仪的色谱条件为：采用菲罗门 Luna色谱柱，规格150×4.6mm，填料粒径5μm；柱温60℃，等度洗脱，流速为0.8ml/min；采用检测器为紫外检测器，检测波长220nm。

5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，其特征在于：所述步骤4）中记录色谱图后，供试品溶液的色谱图中如显异构体峰，杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.2倍；异构体含量的具体计算公式如下：

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