[发明专利]一种纳米粒子和表面活性剂复合毒性的评价方法

说明书

本申请公开了一种纳米粒子和表面活性剂复合毒性的评价方法，包括以下步骤；S1、配置胚胎培养液，所述胚胎培养液包括5mMNaCl、0.17mM KCl、0.43mM CaCl₂和0.33mM MgSO₄，收集并挑选健康的斑马鱼胚胎，将斑马鱼胚胎放置于培养液中进行培养；S2、准备待测试溶液，将配置好的待测试溶液一一对应加入到含有胚胎的培养液中，对受精时间为72小时的胚胎的心率进行测试，对受精120小时后胚胎的成活率和孵化时间进行测定；S3、对受精120小时的斑马鱼幼鱼的活性氧含量、超氧化物歧化酶含量、谷胱甘肽含量进行测定。本申请能够较短的周期内得出纳米粒子和表面改性剂复合后的毒性影响。

技术领域

本申请涉及一种纳米粒子和表面活性剂复合毒性的评价方法。

背景技术

纳米颗粒具有比表面积大、性能优异等特点，被广泛应用于生物材料、医疗材料等领域中。但是由于部分纳米粒子和基体的相容性不好，因此通常都会使用表面活性剂对纳米粒子的表面进行修饰，经过表面活性剂改性后可以进一步增强纳米粒子的功能并提高纳米粒子和基体的相容性，使得改性后的纳米粒子能够更广泛的应用于医药、食品技术等领域中。

为了提高使用的安全性和健康性，需要对纳米颗粒和表面活性剂复合后的安全性进行评价，目前对于一些物质的安全性主要有体内和体外两种方式进行试验，体外通常为细胞培养或者生化试验，但是由于该方法不能够模拟生物体的代谢、吸收等问题，结果可靠性差。体内试验则是进行活体试验，利用小白鼠、兔子、猴子等来进行试验，虽然和体外试验相比具有更好的可靠性，但是上述的动物活体试验周期较长，成本高。

发明内容

本申请提供一种纳米粒子和表面活性剂复合毒性的评价方法。

本申请采用如下的技术方案：

一种纳米粒子和表面活性剂复合毒性的评价方法，包括以下步骤；

S1、配置胚胎培养液，所述胚胎培养液包括5mMNaCl、0.17mM KCl、0.43mM CaCl₂和0.33mM MgSO₄，收集并挑选健康的斑马鱼胚胎，将斑马鱼胚胎放置于培养液中进行培养；

S2、准备待测试溶液，将配置好的待测试溶液一一对应加入到含有胚胎的培养液中，对受精时间为72小时的胚胎的心率进行测试，对受精120小时后胚胎的成活率和孵化时间进行测定；

S3、对受精120小时的斑马鱼幼鱼的活性氧含量、超氧化物歧化酶含量、谷胱甘肽含量进行测定。

通过采用上述技术方案，配置好培养液，斑马鱼的胚胎放置培养液中进行培养成长，将待测试的物质配置成溶液，并添加到含有胚胎的培养液中，对培养的孵化时间和成活率进行测定，通过成活率可以看出待测试溶液对培养的生存是否造成影响。斑马鱼胚胎到成为幼鱼的时间短，从而能够大大缩短试验的时间周期，且斑马鱼养殖简单可以降低试验成本。对受精120小时后的斑马鱼幼鱼活性氧含量、超氧化物歧化酶含量、谷胱甘肽含量、过氧化氢酶含量水平进行测试，可以看出待测试溶液对生物体的一些安全性影响。

可选的，所述待测试溶液包括纳米粒子溶液、表面活性剂溶液以及纳米粒子和表面活性剂混合在一起的溶液。

通过采用上述技术方案，待测试溶液包括纳米粒子溶液、表面活性剂溶液以及纳米粒子和表面活性剂混合在一起的溶液，从而可以看出三个不同的溶液对斑马鱼幼鱼的影响，从而得到三个溶液使用的安全性。

可选的，所述纳米粒子为沸石咪唑酯骨架纳米颗粒。

可选的，所述表面活性剂为氯化十六烷基吡啶。

可选的，所述斑马鱼的胚胎通过如下方法选择；将3只雌性斑马鱼和2只雄性斑马鱼放入产卵箱中，并用隔板将雌性斑马鱼和雄性斑马鱼隔开，次日取走隔板，进行自然交配并收集受精卵，受精卵用培养液清洗三次后放置于培养皿中。