[发明专利]一种检测黄芪桂枝五物汤物质基准中六种成分含量的方法

说明书

本发明公开了一种检测黄芪桂枝五物汤物质基准中六种成分含量的方法，属于药物分析领域。所述方法包括以下步骤：供试品溶液的制备、混合对照品溶液的制备、阳性样品溶液的制备、HPLC检测；所述六种成分为芍药内酯苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、肉桂酸和6‑姜辣素，以上六种成分涵盖了黄芪桂枝五物汤处方中五味药材的其中四味，能够更加全面表征黄芪桂枝五物汤物质基准的质量；HPLC检测中采用HPLC波长切换法同时测定黄芪桂枝五物汤物质基准中六种有效成分的含量，其操作简便、结果可靠、精密度高、专属性强，适用于经典名方黄芪桂枝五物汤复方制剂研发的质量控制。

技术领域

本发明属于药物分析领域，涉及一种检测黄芪桂枝五物汤物质基准中六种成分含量的方法。

背景技术

黄芪桂枝五物汤由黄芪、桂枝、芍药、生姜、大枣五味中药材制成，主要用于治疗以肢体麻木，自汗浮肿为特征的疾病。适用于肌肉疏松，虚胖，皮肤缺乏弹性，腹部松软，下肢多有浮肿的患者，一般会伴有乏力，头晕，胸闷，气短，心悸等症状。

经典名方的物质基准是经典名方复方制剂的研究与开发中的关键环节，承接了经典名方的古法制备工艺和现代制剂工艺，含量测定是控制物质基准质量的主要方法。目前没有针对黄芪桂枝五物汤物质基准进行多成分含量测定的报道或专利，大多是黄芪桂枝五物汤汤剂或颗粒的多成分含量测定。

文献(HPLC法同时测定黄芪桂枝五物汤中6种有效成分的含量[J].沈阳药科大学学报,2022,39(7):791-797)报道了黄芪桂枝五物汤汤剂同时测定六种成分含量的方法，以上六种成分具体是黄芪、桂枝、白芍中所含的芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、肉桂酸和刺芒柄花素。

中国专利CN 109521106 A公开了一种同时检测黄芪桂枝五物颗粒中四种成分含量的方法，所述四种成分为芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、桂皮醛、6-姜辣素，该方法包括将待测样品用提取溶剂30～80％甲醇提取，提取液过滤后直接上高效液相色谱仪进行检测的步骤。以上专利能同时检测出黄芪桂枝五物颗粒中四种物质的含量，但同时测定的指标成分较少，难以全面表征黄芪桂枝五物颗粒物质基准的质量。

因此，有必要探索一种重复性、稳定性、精密度高，专属性强的检测黄芪桂枝五物汤物质基准中各成分含量的方法。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种重复性、稳定性、精密度高、专属性强的可同时检测黄芪桂枝五物汤物质基准中六种成分含量的方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

提供了一种检测黄芪桂枝五物汤物质基准中六种成分含量的方法，包括以下步骤：供试品溶液的制备、混合对照品溶液的制备、阳性样品溶液的制备、HPLC检测；所述六种成分为芍药内酯苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、肉桂酸和6-姜辣素。

进一步地，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：

(1)取黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣煎煮；

(2)将步骤(1)中得到的煎煮液过滤，滤液浓缩、冻干，即得黄芪桂枝五物汤物质基准样品；

(3)取步骤(2)中得到的样品，加入甲醇，称重、超声、补重、过滤，取续滤液，即得供试品溶液。

进一步地，步骤(1)中所述黄芪、桂枝、白芍、生姜、大枣的重量比为8-9：8-9：8-9：16-17：6-8。

进一步地，步骤(1)中所述煎煮包括以下步骤：加水1100-1300mL，煮至出液350-450mL；优选地，加水1200mL，煮至出液400mL。

进一步地，步骤(3)中所述样品、甲醇的用量比为0.5-1.5g：20-30mL。