[发明专利]膨大弯颈霉ZJPH2105在生物催化制备手性芳香醇中的应用

权利要求书

1.一种膨大弯颈霉(Tolypocladiuminflatum)在不对称还原潜手性酮化合物生物催化制备手性芳香醇中的应用，所述膨大弯颈霉为膨大弯颈霉(Tolypocladiuminflatum)ZJPH2105，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年8月29日，保藏编号：CCTCCM 20221346，地址：中国，武汉，武汉大学，430072。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的应用为：以膨大弯颈霉经发酵培养获得的湿菌体为酶源细胞，以式I所示酮类化合物为底物，加入辅助底物，以pH 6.0-8.0的磷酸盐缓冲液为反应介质构成转化体系，在16-37℃、100-200rpm条件下进行反应，反应结束后将反应液进行分离纯化，获得式II所示手性芳香醇类化合物；所述辅助底物为葡萄糖、麦芽糖、果糖、甲醇、异丙醇或甘油；所述湿菌体的质量以缓冲液体积计为50-400g/L；所述底物的浓度以缓冲液体积计为5-30mmol/L；当所述辅助底物为葡萄糖、麦芽糖、果糖或甘油时，所述辅助底物的质量以缓冲液体积计为20-200g/L，当所述辅助底物为甲醇或异丙醇时，所述辅助底物的体积为所述缓冲液的体积的5-20％；

其中，R₁为H、卤素、NO₂、OCH₃或CF₃，R₂为C₁-C₄烷基或CF₃。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：R₁为Cl、Br或CF₃，R₂为CH₃或CF₃。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述式I化合物为下列之一：4'-溴-2,2,2-三氟苯乙酮、4'-溴苯乙酮、4'-氯苯乙酮、4'-三氟甲基苯乙酮。

5.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述反应的温度为25℃-30℃。

6.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述辅助底物为甘油，所述辅助底物的质量以缓冲液体积计为50g/L。

7.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液的pH值为7.0。

8.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述底物的浓度以缓冲液体积计为10mmol/L。

9.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述湿菌体的质量以缓冲液体积计为200-350g/L。

10.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述湿菌体按如下方法获得：

1)斜面培养：将膨大弯颈霉(Tolypocladiuminflatum)ZJPH2105接种至斜面培养基中，25℃恒温培养6d；

2)液体培养：从步骤1)中所得的斜面菌种挖取1cm²大小的菌块接入液体培养基中，16-37℃、120-250rpm条件下发酵培养2-5d，所得发酵液离心，所得沉淀用0.1M，pH值7.0的K₂HPO₄-KH₂PO₄缓冲液洗涤，离心，获得所述湿菌体。