[发明专利]PpERF98基因在调控桃流胶病抗性中的应用

说明书

本发明涉及PpERF98基因在调控桃流胶病抗性中的应用，本发明通过基因工程手段，在PpERF98基因的开放阅读框序列中获取一段特异性目标片段,并设计目标片段引物进行扩增；通过酶切法将目标片段与病毒介导的基因沉默（VIGS）载体pCaRNA3融合，成功构建VIGS载体；通过农杆菌介导的方法将VIGS载体转化到桃植株，降低PpERF98的表达，获得具有流胶病抗性的植株材料；所述开放阅读框全长序列引物为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。本发明通过转基因手段提高桃树对流胶病菌的抗性，显著降低流胶病发病率，减少桃流胶病带来的经济损失。

技术领域

本发明涉及桃流胶病防治方法领域，具体涉及PpERF98基因在调控桃流胶病抗性中的应用。

背景技术

桃树流胶病是一种积累性的枝干病害，在长江流域及其以南地区发生普遍，是我国桃生产中最严重的病害之一。该病引起桃树主干、主枝等部位组织坏死，造成树势衰弱，降低果实产量和品质，缩短桃树的寿命，严重影响经济效益。引起桃流胶病的病原菌大部分属葡萄座腔菌科真菌，该菌属于半活体营养型真菌，可以侵染至桃树的木质部，这导致桃流胶病的防治存在困难。目前，尚未发现抗桃流胶病的抗性材料。因此，解析桃树的抗性基因是桃生产中亟待解决的问题，研究结果将为流胶病的防治和抗流胶病材料的创制提供重要的理论基础。

发明内容

本发明的目的在于克服目前没有行之有效的防治手段和抗流胶病的桃资源的问题，提供PpERF98基因在调控桃流胶病抗性中的应用。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

PpERF98基因在调控桃流胶病抗性中的应用，其特征在于，所述PpERF98基因的序列为SEQ ID NO：5。

上述PpERF98基因在调控桃流胶病抗性中的应用，是通过基因工程的方法沉默桃PpERF98基因来提高桃的流胶病抗性。

具体应用方法为通过在PpERF98基因的全长序列中选取一段目标片段，设计目标片段的引物对VIGS-PpERF98进行扩增，通过酶切法将目标片段与病毒介导的沉默载体pCaRNA3相连，构建VIGS载体，将VIGS载体导入桃植株来提高桃对流胶病的抗性；所述目标片段的序列为SEQ ID NO：6。

进一步的，所述目标片段的引物对VIGS-PpERF98序列为SEQ ID NO：3和SEQ IDNO：4。

本发明的有益效果为：本发明发现PpERF98基因与桃流胶病抗性有关，可通过基因工程手段沉默桃PpERF98基因来提高流胶病抗性，可显著降低流胶病发病率，减少因桃流胶病带来的经济损失。

附图说明

图1为PpERF98基因全长的电泳图片；

图2为不同物种中ERF98氨基酸序列比对分析示意图；

图3为不同桃品种接种桃流胶病菌后的发病症状和病斑比较示意图；

图4为PpERF98基因在不同桃品种接种流胶病菌后的相对表达量示意图；

图5为桃植株沉默PpERF98基因的沉默效率示意图；

图6为沉默PpERF98基因的桃植株接种流胶病菌的发病症状和病斑面积示意图；

图7为沉默PpERF98基因的桃植株接种流胶病后病程相关基因的相对表达量示意图；

图8为桃植株过表达PpERF98基因的效率示意图；

图9为过表达PpERF98基因的桃植株接种流胶病菌的发病症状和病斑面积示意图；