[发明专利]一种豌豆蚜蛋白在用于拒食中的应用

说明书

本发明涉及一种豌豆蚜蛋白在用于拒食中的应用，所述豌豆蚜蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示和/或SEQ ID No.8。

技术领域

本发明涉及生物防治领域。

背景技术

蚜虫是一种世界性的农林害虫，通过直接取食植物以及传播植物病毒造成严重危害。

蚜虫繁殖快、世代短且抗药性强导致防治较为困难，而传统化学农药的使用会造成严重的环境污染问题，因此亟待开发环境友好型的植物源农药来进行防控。

发明内容

本发明之一提供了一种豌豆蚜蛋白在用于拒食中的应用，所述豌豆蚜蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示和/或SEQ ID No.8。

在一个具体实施方式中，编码氨基酸序列如SEQ ID No.7所示的豌豆蚜蛋白的核酸如SEQ ID No.3所示；编码氨基酸序列如SEQ ID No.8所示的豌豆蚜蛋白的核酸如SEQ IDNo.6。

在一个具体实施方式中，所述豌豆蚜蛋白所识别的拒食化合物为蓼二醛。也就是说，豌豆蚜在所述豌豆蚜蛋白功能正常的情况下会对产生蓼二醛的食源产生拒食行为。

本发明的有益效果：

本发明首次发现氨基酸序列如SEQ ID No.7或SEQ ID No.8所示的豌豆蚜蛋白能够介导豌豆蚜的拒食行为，特别是对含有化合物蓼二醛的食源的拒食行为，这说明该蛋白属于豌豆蚜拒食受体蛋白，该拒食受体靶标的明确为筛选蓼二醛拒食类似物的应用提供了重要的理论基础。

附图说明

图1为不同浓度的蓼二醛处理下蚜虫在24小时内的拒食指数图。

图2为表达ApTR基因的爪蟾卵母细胞对于蓼二醛刺激的反应检测图；图A为爪蟾卵母细胞中表达的ApTR(A)对不同浓度蓼二醛刺激的反应强度；B图为爪蟾卵母细胞中表达的ApTR(B)对不同浓度蓼二醛刺激的反应强度；C图为豌豆蚜ApTR(A)与ApTR(B)对于不同蓼二醛浓度梯度反应的差异比较分析。

图3为对豌豆蚜ApTR基因进行RNAi后豌豆蚜的拒食指数图，与空白对照组与阴性对照组相比，a、b同一字母表示在α＝0.05水平上差异不显著，不同字母表示在α＝0.05水平上差异显著。

具体实施方式

以下通过优选的实施案例的形式对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但其不构成对本发明的限制。

如无特别说明，本发明的实施例中的试剂均可通过商业途径购买。

PCR试剂盒(Takara，日本)；

RNA提取试剂Trizol(Invitrogen，美国)；

反转录试剂盒Revert Aid First Strand cDNA Synthesis Kit(Transgen，中国)；

实时荧光定量PCR试剂盒SYBR PRemix Ex TaqTM(Takara，日本)；

琼脂糖凝胶回收试剂盒(全式金，中国)；

抗生素氨苄(Ampicillin)、IPTG和X-gal(Sigma，美国)；

克隆载体pEASY-BluntT(Transgen，中国)；

表达载体pT7Ts(Invitrogen，美国)；

感受态细胞Trans1-T1(全式金，中国)；

质粒小提试剂盒(天根，中国)；

cRNA合成试剂盒(mMESSAGEmMACHINE T7 kit)(Ambion，美国)；