[发明专利]一种用于色氨酸检测的肽适体以及基于该肽适体的比色型色氨酸检测方法

权利要求书

1.一种用于色氨酸检测的肽适体，所述肽适体序列如SEQ ID NO.1所示，所述肽适体的N末端被1个半膀氨酸组成的空间单元修饰。

2.基于权利要求1或2所述肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）配制检测溶液：将氯金酸溶液滴加到超纯水中，然后滴加权利要求1所述的肽适体的溶液，搅拌，再滴加硼氢化钠溶液，继续搅拌，即得检测溶液；所述氯金酸溶液是氯金酸质量浓度为8-15%的氯金酸溶液，所述肽适体溶液是肽适体的浓度为1.5-2.5 mM的肽适体溶液，所述硼氢化钠溶液是硼氢化钠浓度为0.2-0.4M的硼氢化钠溶液；所述氯金酸溶液、肽适体溶液、硼氢化钠溶液的添加比例关系为：每10mL超纯水中添加10-20 μL氯金酸溶液、10-20μL肽适体溶液和15-25μL硼氢化钠溶液；

（2）将含有色氨酸的溶液，滴入检测溶液中，可直接肉眼观察颜色变化，之后加入氯化钾溶液，在紫外可见光分光光度计运行的情况下，扫描吸光度；所述含有色氨酸的溶液与检测溶液的体积比为1:6至1:12；所述氯化钾溶液是氯化钾浓度为0.8-1.2 M的氯化钾溶液，所述氯化钾溶液与检测溶液的体积比为1:4至1:8。

3.如权利要求2所述基于肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，步骤（1）中添加肽适体溶液后的搅拌时间为0.5h，添加硼氢化钠溶液后的搅拌时间为1.5h。

4.如权利要求2所述基于肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述氯金酸溶液是氯金酸质量浓度为10%的氯金酸溶液，所述肽适体溶液是肽适体的浓度为2.0 mM的肽适体溶液，所述硼氢化钠溶液是硼氢化钠浓度为0.3M的硼氢化钠溶液；所述氯金酸溶液、肽适体溶液、硼氢化钠溶液的添加比例关系为：每10mL超纯水中添加15 μL氯金酸溶液、15μL肽适体溶液和20μL硼氢化钠溶液。

5.如权利要求2所述基于肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述超纯水是电阻率大于18 MΩ*cm的超纯水。

6.如权利要求2所述基于肽适体的色氨酸比色型检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述紫外可见光分光光度计扫描范围为：400-800 nm。

7.如权利要求2所述基于肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述氯化钾溶液是氯化钾浓度为1.0 M的氯化钾溶液。

8.如权利要求2所述基于肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述含有色氨酸的溶液与检测溶液的体积比为1:9；所述氯化钾溶液与检测溶液的体积比为1:6。

9.如权利要求2所述基于肽适体的比色型色氨酸检测方法，其特征在于，所述基于肽适体的色氨酸比色型检测方法在10.0 μM-1.0 mM范围内具有良好的线性关系；其线性方程为：

y= 0.0006812x+0.2620 (R² = 0.9845)

其中，y是溶液在589 nm的吸光度，x是色氨酸浓度（μM）。

10.如权利要求1所述的肽适体在制备检测色氨酸制剂中的应用。