[发明专利]一种分离测定丙氨酸酯类盐含量的方法在审
申请号: | 202211180197.2 | 申请日: | 2022-09-27 |
公开(公告)号: | CN115541749A | 公开(公告)日: | 2022-12-30 |
发明(设计)人: | 刘英;陈玉娟;周宁 | 申请(专利权)人: | 华熙生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/96 |
代理公司: | 北京唐颂永信知识产权代理有限公司 11755 | 代理人: | 刘伟 |
地址: | 250101 山东省济*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分离 测定 丙氨酸 酯类盐 含量 方法 | ||
1.一种分离测定丙氨酸酯类盐含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:
采用氨基酸分析仪,以阳离子交换树脂柱为分离柱,以流动相进行梯度洗脱,利用衍生化试剂和反应柱进行衍生化反应后,采用光度法测定丙氨酸酯类盐的含量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述流动相为无机溶剂,优选,所述无机溶剂为无机酸或其盐、无机碱、乙醇中任意一种或任意两种的混合物。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法,其特征在于,所述衍生化试剂包括衍生化反应试剂和衍生化缓冲液。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述流动相包括:
流动相A,为磷酸和乙醇的水溶液,优选,磷酸10-20wt%、乙醇5-15wt%;
流动相B,为磷酸和醋酸钠的水溶液,优选,磷酸2-10wt%、醋酸钠5-10wt%;
流动相C,为醋酸钠的水溶液,优选,醋酸钠溶液2-10wt%;
流动相D,为醋酸钠和乙醇的水溶液,优选,醋酸钠5-10wt%、乙醇0.5-5wt%,
流动相E,为乙醇和氢氧化钠的水溶液,优选乙醇溶液60-85wt%、氢氧化钠0.5-5wt%。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其特征在于,所述衍生化试剂包括,
衍生化反应试剂R1,30-50mg/mL茚三酮丙二醇溶液;
衍生化缓冲液R2,15-25mg/mL乙酸钠+20-60mg/mL乙二醇;
衍生化缓冲液R3,4-6%乙醇溶液。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述梯度洗脱和衍生化反应条件包括:
采用流动相A;
随后,采用流动相B;
随后,采用流动相C;
随后,采用流动相A;
随后,采用流动相D,衍生化反应试剂R1,衍生化缓冲液R2;
随后,采用流动相D,衍生化反应试剂R1,衍生化缓冲液R2;
随后,采用流动相E,衍生化缓冲液R3;
随后,采用流动相A。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,所述分离柱为强酸型阳离子交换树脂柱,优选为含有磺酸基的阳离子交换树脂柱,所述反应柱的填充物为石英砂或者是金刚砂。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法,其特征在于,所述分离柱柱温为50-60℃;所述反应柱柱温为125-140℃。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,其特征在于,所述光度法的检测波长为550nm-575nm。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其特征在于,进样到所述分离柱的进样量为10-30μL。
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