[发明专利]一种用于水解磷脂的改性脂肪酶及其制备方法与应用在审
申请号: | 202211180639.3 | 申请日: | 2022-09-27 |
公开(公告)号: | CN115491365A | 公开(公告)日: | 2022-12-20 |
发明(设计)人: | 钱俊青;史波波;顾国秀 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C12P7/64 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 水解 磷脂 改性 脂肪酶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于水解磷脂的改性脂肪酶,其特征在于,所述改性脂肪酶按如下方法制备:将脂肪酶水溶液调pH至3.5~4.5,室温静置1~2小时;然后在搅拌下滴加体积浓度为0.01-1.0%的戊二醛水溶液后,室温静置1~3小时,离心,沉淀用去离子水洗涤,干燥至水含量5.0%以下,获得改性脂肪酶。
2.如权利要求1所述的改性脂肪酶,其特征在于,所述搅拌条件为在60~90转/分的机械搅拌;所述干燥是在40℃真空鼓风干燥。
3.如权利要求1所述的改性脂肪酶,其特征在于,所述脂肪酶水溶液中酶浓度为0.15~0.40g/mL;所述戊二醛水溶液与脂肪酶水溶液体积比为0.001-0.1:1。
4.如权利要求1所述的改性脂肪酶,其特征在于所述脂肪酶水溶液中脂肪酶包括黑曲霉脂肪酶、假丝酵母脂肪酶、米曲霉脂肪酶、根霉脂肪酶。
5.一种权利要求1所述改性脂肪酶在水解磷脂制备乳化磷脂中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的应用为:(1)将磷脂分散在去离子水中并调节pH至7-9,加入所述改性脂肪酶,搅拌分散均匀,在40-60℃、200转/分下搅拌水解4-9h,水解反应结束加入6号溶剂油,在40-60℃、200转/分下搅拌萃取1-3h,室温静置分层,收集上层6号溶剂油相;(2)上层6号溶剂油相加入氢氧化钠和氯化钠的水溶液,在20-40℃、50-150转/分下搅拌反应10-20min,离心,取有机相旋转蒸发至干,得到乳化磷脂。
7.如权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(1)磷脂包括大豆磷脂。
8.如权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(1)所述磷脂分散在去离子水中的方法为:将磷脂加入去离子水中,在70-90℃、300-600W下超声分散10-25min,再在100-300转/分搅拌下,调节pH至7-9;所述去离子水体积用量以磷脂质量计为4-8mL/g。
9.如权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(1)磷脂与改性脂肪酶质量比为1:0.05-0.4;所述6号溶剂油体积用量以磷脂质量计为1-5mL/g。
10.如权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(2)中氢氧化钠和氯化钠的水溶液中氢氧化钠浓度为10-30mg/mL,氯化钠浓度为100-200mg/mL;所述氢氧化钠和氯化钠的水溶液与6号溶剂油相体积比为1-3:1。
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