[发明专利]一种花生过敏诊断的标志物、试剂盒在审

专利信息
申请号: 202211180772.9 申请日: 2022-09-27
公开(公告)号: CN115772560A 公开(公告)日: 2023-03-10
发明(设计)人: 车会莲;刘曼曼;李博雅 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12Q1/6883 分类号: C12Q1/6883;C12N15/11;C12Q1/6851
代理公司: 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 代理人: 周新楣
地址: 100083 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 花生 过敏 诊断 标志 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种花生过敏诊断标志物,其特征在于,包括长链非编码RNA ENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904中的一种或几种。

2.一种检测花生过敏的试剂盒,其特征在于,包括检测权利要求1所述的长链非编码RNA ENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904表达量的试剂。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂包括扩增长链非编码RNAENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904的引物;

ENSRNOT00000087227的引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;

ENSRNOT00000090335的引物序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示;

ENSRNOT00000085965的引物序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示;

ENSRNOT00000081904的引物序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示。

4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述引物的使用浓度独立为8~12μM。

5.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述扩增的体系以20μL计,包括以下组分:2×TaqPro Universal SYBR qPCRMasterMix 10μL,上游引物0.4μL、下游引物0.4μL,cDNA 1μL,ddH2O 8.2μL。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述扩增的程序如下:预变性95℃30s;变性95℃3~10s,退火60℃10~30s;熔解曲线95℃15s,60℃30s,95℃15s。

7.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,将所述长链非编码RNAENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904表达量带入诊断模型Y=38.5719×ENSRNOT00000087227+313.8883×ENSRNOT00000090335+51.874×ENSRNOT00000085965-60.5057×ENSRNOT00000081904-8.9084中进行判断,其中,△Ct=Ct目的基因-Ct内参基因;计算Y值,当Y值0时,判定为花生过敏阳性,反之则为阴性。

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