[发明专利]一种花生过敏诊断的标志物、试剂盒在审
申请号: | 202211180772.9 | 申请日: | 2022-09-27 |
公开(公告)号: | CN115772560A | 公开(公告)日: | 2023-03-10 |
发明(设计)人: | 车会莲;刘曼曼;李博雅 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12N15/11;C12Q1/6851 |
代理公司: | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人: | 周新楣 |
地址: | 100083 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 花生 过敏 诊断 标志 试剂盒 | ||
1.一种花生过敏诊断标志物,其特征在于,包括长链非编码RNA ENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904中的一种或几种。
2.一种检测花生过敏的试剂盒,其特征在于,包括检测权利要求1所述的长链非编码RNA ENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904表达量的试剂。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂包括扩增长链非编码RNAENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904的引物;
ENSRNOT00000087227的引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;
ENSRNOT00000090335的引物序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示;
ENSRNOT00000085965的引物序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示;
ENSRNOT00000081904的引物序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述引物的使用浓度独立为8~12μM。
5.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述扩增的体系以20μL计,包括以下组分:2×TaqPro Universal SYBR qPCRMasterMix 10μL,上游引物0.4μL、下游引物0.4μL,cDNA 1μL,ddH2O 8.2μL。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述扩增的程序如下:预变性95℃30s;变性95℃3~10s,退火60℃10~30s;熔解曲线95℃15s,60℃30s,95℃15s。
7.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,将所述长链非编码RNAENSRNOT00000087227、ENSRNOT00000090335、ENSRNOT00000085965和ENSRNOT00000081904表达量带入诊断模型Y=38.5719×ENSRNOT00000087227+313.8883×ENSRNOT00000090335+51.874×ENSRNOT00000085965-60.5057×ENSRNOT00000081904-8.9084中进行判断,其中,△Ct=Ct目的基因-Ct内参基因;计算Y值,当Y值0时,判定为花生过敏阳性,反之则为阴性。
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