[发明专利]一种耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法及其装置

权利要求书

1.一种耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，包括：取待测样品于密闭环境下进行选择性培养，实时检测所述密闭环境中的CO₂的含量，根据单位时间内CO₂的含量变化对待测样品中的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行检测；所述选择性培养中使用的选择性培养基中添加有碳青霉烯类抗生素。

2.根据权利要求1所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，所述选择性培养基，包括如下的组分：蛋白胨0.001-5wt％,酵母粉0.001-5wt％，氯化钠0-3wt％，K₂HPO₄ 0-2wt％，MgSO₄ 0-0.2wt％；和/或

所述碳青霉烯类抗生素的添加量为每1ml选择性培养基中添加0.1-20微克碳青霉烯类抗生素。

3.根据权利要求2所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，所述选择性培养基还包括：Tween80 0.05-0.5wt％，胆盐0.1-3wt％，结晶紫0.1-100mg/L，乳酸链球菌素0-100mg/L，柠檬酸三钠0.1-5wt％；和/或

所述碳青霉烯类抗生素包括美罗培南、亚胺培南和厄他培南中的至少一种。

4.根据权利要求1-3任一项所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，利用CO₂指示剂实时检测所述密闭环境中的CO₂的含量；

可选的，所述CO₂指示剂为颜色指示剂，颜色随着CO₂的含量变化而发生变化；

可选的，采用CO₂指示剂与所述密闭环境中的CO₂发生作用，实时检测所述CO₂指示剂的光度值信号，根据单位时间内的光度值信号变化对待测样品中的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行检测。

5.根据权利要求4所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，所述CO₂指示剂包括溴甲酚紫；

可选的，所述CO₂指示剂为溴甲酚紫溶液，浓度为1-100ppm，pH为7。

6.根据权利要求4或5所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，单位时间内，当检测到所述CO₂指示剂的光度值信号发生升高变化，则待测样品中含有耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌；反之，则待测样品中不含有耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌。

7.根据权利要求4-6任一项所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，选择性培养基与CO₂指示剂的体积比例为4:1-10:1，培养温度为25-45℃，培养时间为0-24h，且不为0。

8.根据权利要求7所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测方法，其特征在于，所述待测样品包括平板菌样、液体样品或粪便固体样品；

可选的，当待测样品为平板菌样，直接挑取菌落加入选择性培养基中；

可选的，当待测样品为液体样品，取液体样品加入选择性培养基中，液体样品与选择性培养基的体积比例为0.001:3-5:3；

可选的，当待测样品为粪便固体样品，进行稀释，取稀释后的粪便固体样品加入选择性培养基中，稀释后的粪便固体样品与选择性培养基的体积比例为取0.1:3-5:3。

9.一种耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测装置，其特征在于，包括：

反应单元，用于待测样品在密闭环境下进行选择性培养；

检测单元，与所述反应单元密闭连通，用于实时检测所述密闭环境中的CO₂的含量，根据单位时间内CO₂的含量变化对待测样品中的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行检测。

10.根据权利要求9所述的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌快速检测装置，其特征在于，所述检测单元中具有CO₂指示剂单元，所述CO₂指示剂单元内含有CO₂指示剂，所述CO₂指示剂与所述密闭环境中的CO₂发生作用，实时检测所述CO₂指示剂的光度值信号，根据单位时间内的光度值信号变化对待测样品中的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行检测。