[发明专利]一种利用土壤蚯蚓生物标志物诊断土壤污染情况的方法在审
申请号: | 202211213103.7 | 申请日: | 2022-09-29 |
公开(公告)号: | CN115372592A | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 陶晔;林芹;查富蓉;查富星;龙欢 | 申请(专利权)人: | 上海凌恩生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/24 | 分类号: | G01N33/24 |
代理公司: | 重庆百润洪知识产权代理有限公司 50219 | 代理人: | 陈付玉 |
地址: | 200000 上海市嘉*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 土壤 蚯蚓 生物 标志 诊断 土壤污染 情况 方法 | ||
1.一种利用土壤蚯蚓生物标志物诊断土壤污染情况的方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1,人工养殖蚯蚓:选择蚯蚓的品种为红正蚓、陆正蚓和赤子爱胜蚓;
S2,称取待诊断的土壤,均分为四等分标记为1、2、3、4号待测组,调整土壤含水量;
S3,提取红正蚓的溶酶体、陆正蚓和赤子爱胜蚓的DNA样本作为对照样本进行保存备用;
S4,选择数量相同的红正蚓、陆正蚓和赤子爱胜蚓分别放入1、2、3号待测组的土壤中,再选择数量相同三种蚯蚓共同放入4号待测组土壤中;
S5,从1、2、3、4号待测组的土壤中分离出各种蚯蚓,再次提取每一条红正蚓的溶酶体、陆正蚓和赤子爱胜蚓的DNA样本,检测红正蚓的溶酶体中性红保持时间,并与对照样本进行比较,记录数据;检测陆正蚓和赤子爱胜蚓的DNA样本的损伤情况与对照样本进行比较,记录数据;
S5,计算红正蚓、陆正蚓和赤子爱胜蚓各组数据的平均值,对土壤污染情况进行判断。
2.根据权利要求1所述的一种利用土壤蚯蚓生物标志物诊断土壤污染情况的方法,其特征在于:所述红正蚓、陆正蚓和赤子爱胜蚓在20-25℃的环境中用牛粪或者猪粪为食物进行培养15-20天。
3.根据权利要求1所述的一种利用土壤蚯蚓生物标志物诊断土壤污染情况的方法,其特征在于:采用乙草胺和Se处理红正蚓,观察溶酶体中性红保持时间。
4.根据权利要求1所述的一种利用土壤蚯蚓生物标志物诊断土壤污染情况的方法,其特征在于:陆正蚓和赤子爱胜蚓的DNA样本采用蚯蚓腹腔细胞的DNA。
5.根据权利要求1所述的一种利用土壤蚯蚓生物标志物诊断土壤污染情况的方法,其特征在于:陆正蚓和赤子爱胜蚓的DNA样本的损伤情况采用彗星实验分析法进行分析。
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