[发明专利]一种乳酸菌冻干保护剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 202211215540.2 | 申请日: | 2022-09-30 |
公开(公告)号: | CN115558620B | 公开(公告)日: | 2023-10-20 |
发明(设计)人: | 方曙光;王涛;汪欣;朱建国 | 申请(专利权)人: | 微康益生菌(苏州)股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/04;C12R1/225;C12R1/46 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 陈小龙 |
地址: | 215200 江苏省苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乳酸菌 保护 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种乳酸菌冻干保护剂,其特征在于,按照重量份计所述乳酸菌冻干保护剂包括如下组分:
2.根据权利要求1所述的乳酸菌冻干保护剂,其特征在于,所述低聚糖选自低聚异麦芽糖、低聚果糖、低聚麦芽糖、低聚木糖、低聚半乳糖中的任意一种或至少两种的组合,优选为低聚异麦芽糖;
优选地,所述小分子多元醇包括山梨糖醇和/或甘露醇,优选为山梨糖醇。
3.根据权利要求1或2所述的乳酸菌冻干保护剂,其特征在于,所述游离氨基酸包括谷氨酸、脯氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、赖氨酸、苏氨酸、精氨酸、酪氨酸中的任意一种或至少两种的组合,优选为甲硫氨酸;
优选地,所述乳酸菌冻干保护剂的pH值为6-7;
优选地,所述乳酸菌冻干保护剂以重量份计包括如下组分:
4.一种如权利要求1-3任一项所述的乳酸菌冻干保护剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:将海藻糖、低聚糖、小分子多元醇、甘露糖、游离氨基酸、乳清粉和水混合,得到所述乳酸菌冻干保护剂。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,以重量份计,所述水的用量为80-120份;
优选地,所述混合后还包括调节pH值的步骤;
优选地,所述调节pH值的调节剂为氢氧化钠或盐酸;
优选地,所述制备方法中还包括灭菌的步骤;
优选地,所述灭菌的温度为105~118℃,所述灭菌的时间为10~20min;
优选地,所述制备方法具体包括:将海藻糖、低聚糖、小分子多元醇、甘露糖、游离氨基酸、乳清粉和水混合,得到混合液;调节所述混合液的pH值为6~7后,105~118℃灭菌处理10~20min,冷却,得到所述乳酸菌冻干保护剂。
6.一种如权利要求1-3任一项所述的乳酸菌冻干保护剂在乳酸菌冻干粉中的应用。
7.一种乳酸菌冻干粉,其特征在于,所述乳酸菌冻干粉包括乳酸菌的菌泥和权利要求1-3任一项所述的乳酸菌冻干保护剂。
8.根据权利要求7所述的乳酸菌冻干粉的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:将所述菌泥与所述乳酸菌冻干保护剂混合后冷冻干燥,得到所述乳酸菌冻干粉。
9.根据权利要求8所述的乳酸菌冻干粉的制备方法,其特征在于,所述菌泥的制备方法包括:将乳酸菌种子液接种至发酵培养基中培养后进行离心,得到所述菌泥;
优选地,所述乳酸菌种子液的接种量为2~4%;
优选地,所述培养的温度为35~43℃,所述培养的时间为8~14h;
优选地,所述发酵培养基包括糖类、牛肉浸粉、蛋白胨、酵母浸膏、磷酸氢二钾、柠檬酸氢二铵、硫酸镁、吐温80和水的组合;
优选地,所述糖类包括葡萄糖和/或乳糖;
优选地,所述发酵培养基的pH值为6~7,优选为6.5~6.8;
优选地,所述培养的过程中体系的pH值为5~6,优选为5.5~5.8;
优选地,所述培养的终点为:所述发酵培养基中的菌液OD600值为7~12,优选为9~11。
10.根据权利要求8所述的乳酸菌冻干粉的制备方法,其特征在于,所述乳酸菌冻干保护剂以其水溶液的形式与菌泥混合;
优选地,所述菌泥与所述乳酸菌冻干保护剂的水溶液的质量比为1:(0.5~2);
优选地,所述冷冻干燥的时间在13.5h以上;
优选地,所述冷冻干燥为梯度升温的冷冻干燥;
优选地,所述梯度升温的冷冻干燥包括依次进行的第一区段、第二区段、第三区段、第四区段、第五区段和第六区段;
所述第一区段的温度为-50~-45℃,持续时间为100~200min;所述第二区段的温度为-35~-30℃,持续时间为200~300min;所述第三区段的温度为-25~-15℃,持续时间为200~300min;所述第四区段的温度为-5~0℃,持续时间为100~200min;所述第五区段的温度为10℃,持续时间为100~200min;所述第六区段的温度为20~30℃,持续时间为100min以上,100min后进行5min升压测试,若测试结果小于10Pa,结束程序。
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