[发明专利]用于诊断乳腺癌化疗导致的心肌损伤的环状RNA标志物、试剂盒及其应用

说明书

一种检测环状RNA标志物的物质的应用，包括下述应用中的一种或多种：A1)在用于制备诊断乳腺癌化疗导致的心肌损伤的产品中的应用；A2)在用于制备筛查乳腺癌化疗导致的心肌损伤的产品中的应用；A3)在用于制备评估乳腺癌化疗导致的心肌损伤的风险产品中的应用；A4)在用于制备乳腺癌化疗导致的心肌损伤的预后评估产品中的应用；A5)在用于制备鉴别区分乳腺癌化疗导致的心肌损伤与其他疾病产品中的应用；所述环状RNA标志物为hsa_circ_0003559，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。上述应用中，hsa_circ_0003559环状RNA标志物在化疗引起的心脏损伤病人的血浆样本中表达显著上调。

技术领域

本发明涉及一种诊断标志物，具体地说是一种用于诊断乳腺癌化疗心肌损伤的环状RNA标志物，以及由该环状RNA标志物制备得到的检测试剂盒，属于分子生物学技术领域。

背景技术

心血管疾病是导致乳腺癌幸存者死亡的主要原因之一。这些继发的心血管疾病大部分是由于癌症化疗药物的心脏毒性导致。临床试验数据表明，曲妥珠单抗利引起的心脏毒性发生率从4.1％到10％不等。蒽环类药物阿霉素是最早引入的化疗药物之一，目前仍是最常用、最有效的抗肿瘤药物之一。尽管靶向酪氨酸激酶和单克隆抗体疗法的出现，但仍然有40～50％的乳腺癌患者使用蒽环类药物，阿霉素的心脏毒性副作用已经被证实。即使在相对较低的200～250mg/m²累积浓度下，心脏毒性的风险估计为7.8％～8.8％。阿霉素的心脏毒副作用范围从无症状的左室射血分数(LVEF)降低到心动过速和心律失常、心肌病、心肌梗死和高度症状性充血性心力衰竭(III-IV级)。超声心动图是肿瘤治疗过程中评估心功能最重要的手段，但传统超声指标左室射血分数(LVEF由于灵敏性低，且受心脏负荷的影响较大，监测早期心功能损害具有一定的局限性。二维斑点追踪技术(2D-STI)和三维斑点追踪技术(3D-STI)是近些年发展起来的超声技术，能够对心肌纵行应变、圆周应变、径向应变、面积应变及各心肌节段应变及心肌扭转、扭矩进行单独分析，已被证明是化疗诱导心脏毒性的可靠早期监测指标，其敏感性优于LVEF。然而，应变成像的主要局限性之一是负荷依赖性，影响心肌功能评估的诊断准确性。心肌做功(GWI)是一个新的参数，通过引入后负荷，克服了LVEF与左心室应变的负荷依赖性，更好地解释应变与动态无创左心室压力的关系。目前关于心肌做功在监测乳腺癌化疗联合靶向治疗过程中心肌损害方面的价值不明确。

迄今为止，临床上还不能准确预测和及时诊断出化疗是否会出现心肌损伤并发症。因此，探索如何早期识别化疗药物引起的心脏损伤具有重大意义。

circRNA是一种具有共价封闭结构的ncRNA，参与调控疾病的发生发展。circRNA由RNA聚合酶II转录，没有5’和3’末端和多聚腺嘌呤尾。circRNA有数百到数千个碱基长，主要由外显子组成。circRNA分子富含microRNA结合位点，在细胞中起到miRNA海绵(miRNAsponge)的作用，进而解除miRNA对其靶基因的抑制作用，升高靶基因的表达水平。此外，circRNA中高度保守的ORFs在体内和体外以独立于5'帽结构的方式编码功能肽，如诱导内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site，IRES)、促进腺苷甲基化(N6-methylladenosine，m6A)和滚环扩增等。与线性RNA不同，circRNA具有特殊的环状共价键结构，这使它们对外切酶具有更高的耐受性。此外，circRNA具有保持性、丰富性和组织特异性，这使得circRNA可作为一些疾病发生发展过程中潜在的生物标志物。

综上所述，乳腺癌化疗心肌损伤的生物标志物一直是本领域是技术人员研究的热点，探索一种circRNA作为乳腺癌化疗心肌损伤标志物有助于对其早诊断、早治疗，有很好的临床意义。

发明内容

本发明所要解决的首要技术问题在于提供一种环状RNA标志物的应用，该环状RNA标志物在制备诊断、筛查、预后评估及区分乳腺癌化疗心肌损伤的物质中的新用途。