[发明专利]一种赤眼鳟放流效果评价方法

权利要求书

1.一种赤眼鳟放流效果评价方法，本方法把待放流的赤眼鳟的亲本的鳍条提取DNA，利用本发明提供的微卫星引物对亲本赤眼鳟DNA进行PCR扩增，利用聚丙烯酰胺凝胶对PCR扩增产物进行电泳，读取每个亲本在每个微卫星引物上面扩增的产物大小，保存其遗传信息，建立遗传档案。对赤眼鳟进行放流后，定时对河流内的赤眼鳟进行回捕，统计捕捞的赤眼鳟中有多少为放流的赤眼鳟。具体统计方法为对回捕到的赤眼鳟进行剪鳍条取样，然后提取所有回捕到的赤眼鳟的DNA，然后利用本发明提供的微卫星引物对待测赤眼鳟DNA进行PCR扩增，利用聚丙烯酰胺凝胶对PCR扩增产物进行电泳，读取每个待测样本在每个微卫星引物上面扩增的产物大小，然后和遗传档案进行比对，看待测样本是否为之前保留放流赤眼鳟亲本的子代，如果待测样本为放流赤眼鳟亲本的子代，则待测样本为放流赤眼鳟个体。计算其中的被放流的个体在回捕群体中的比例，计算回捕率的公式为：(回捕样品中的放流群体数量/回捕样品总数量)％，回捕率越大，说明增殖放流效果越好，从而估算赤眼鳟增殖放流对河流内所有赤眼鳟生态量的贡献，进而确定赤眼鳟增殖放流的效果。

2.一种赤眼鳟放流效果评价方法，其特征在于，包括权利要求1所述的赤眼鳟微卫星标记五组双重PCR引物，具体为10对微卫星引物。具体引物信息如下：

3.根据权利要求1所述的PCR反应体系是25ul：10×PCR Buffer 3ul，2.5mmol/L dNTP2ul，MgCl₂ 3ul，上下游引物各1ul，Taq酶0.5ul，DNA模板2ul，超纯水10.5ul。

4.根据权利要求1所述的PCR反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。