[发明专利]一种铌异质结纳米酶的制备及其应用

权利要求书

1.一种铌异质结纳米酶的制备及其应用，其特征在于：其特征包括如下步骤：

（1）制备CD纳米酶；

（2）制备CD@Nb₂C异质结纳米酶；

（3）CD@Nb₂C异质结纳米酶的光热转换性能和纳米酶活性测试；

（4）CD@Nb₂C异质结纳米酶在体外和体内近红外二区温和光热治疗增强的纳米催化治疗。

2.根据权利要求1所述的一种铌异质结纳米酶的制备及其应用，其特征在于：所述步骤（1）中，制备CD纳米酶的方法为：称取0.04g三硝基芘和0.2g乙二胺，溶于10mL水，完全溶解以后放入相应大小的微波反应管中200℃下微波反应10min，反应完全后冷却至室温，过膜后保存。

3.根据权利要求1所述的一种铌异质结纳米酶的制备及其应用，其特征在于：所述步骤（2）中，制备CD@Nb₂C异质结纳米酶的方法为：称取10mg所制备的少层Nb₂C分散于10mL去离子水中，随后将制备的近红外二区响应的CD纳米酶（2mg/mL）缓慢加入Nb₂C溶液中，混合均匀并于室温下搅拌24h，用去离子水洗除过量CDs并将所制备的CD@Nb₂C异质结纳米酶于冷冻干燥机中冷冻干燥后保存。

4.根据权利要求1所述的一种铌异质结纳米酶的制备及其应用，其特征在于：所述步骤（3）中，CD@Nb₂C异质结纳米酶的光热转换性能和纳米酶活性测试包括如下步骤：

1）将CD@Nb₂C异质结、CD、Nb₂C纳米片在相同浓度下加入离心管中，用功率密度为0.8W/cm²的1064nm激光照射5min以测量它们的光热转化特性，使用红外热成像仪记录温度的变化，每20秒拍照一次，CD@Nb₂C异质结在500μg/mL浓度以及0.8W/cm²功率密度的条件下照射5分钟后上升了55.6^oC，且光热转换效率（η）为61.2%；

2）CD@Nb₂C异质结纳米酶在低强度超声下能够产生大量的羟基自由基（•OH），通过使用3，3，5，5-四甲基联苯胺（TMB）作为探针，运用紫外分光光度计检测654nm处不同超声时间下的吸收峰强度变化来检测CD@Nb₂C异质结纳米酶在超声辐照下的•OH生成效率，以评估其化学动力学性能；

3）所制备的CD@Nb₂C异质结纳米酶可以内源性消耗谷胱甘肽（GSH），通过使用5，5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)（DTNB）作为GSH探针，来评估CD@Nb₂C异质结纳米酶消耗GSH的能力；

4）所制备的CD@Nb₂C异质结纳米酶可以促进产生内源性O₂，通过使用溶解氧检测仪来检测不同pH下的材料水溶液在加入不同浓度的H₂O₂后的氧气产生量来评估CD@Nb₂C异质结纳米酶催化TME中H₂O₂的能力。

5.根据权利要求1所述的一种铌异质结纳米酶的制备及其应用，其特征在于：所述步骤（4）中，CD@Nb₂C异质结纳米酶在体外和体内近红外二区温和光热治疗增强的纳米催化治疗包括如下步骤：

1）通过MTT法对经过CD@Nb₂C异质结处理后的细胞进行细胞活度的检测，将小鼠乳腺癌细胞（4T1）接种到96孔板中，每孔的密度为5000个，培养24小时，随后用不同方式处理细胞，NIR-II激光的功率密度为0.8W/cm²，照射时间为5min，处理结束后细胞继续在37^oC下继续孵育24小时，随后加入MTT试剂孵育4h，最后将每孔中的培养液吸出，加入150μL的二甲基亚砜进行溶解，用酶标仪测定在490nm处的吸收；

2）给3-5周的雌性裸鼠腋窝处皮下种植100μL（500万）的4T1细胞，待肿瘤体积长到100mm³时，将裸鼠分为5组（每组5只）：（1）空白对照组、（2）单独1064nm激光照射（0.8W/cm²，5min）、（3）CD@Nb₂C异质结纳米酶、（4）CD+1064照射（0.8W/cm²，5min）、（5）CD@Nb₂C+1064照射（0.8W/cm²，5min），每天记录裸鼠的体重和每隔一天测量肿瘤的体积大小以评估CD@Nb₂C异质结纳米酶的体内的治疗效率。