[发明专利]一种抗菌肽及其应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及IPC C07K14，更具体的，涉及一种抗菌肽及其应用。本发明提供了抗菌肽1～18，能够有效的抑制痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的生长繁殖，且其溶血性较低，具有较好的生物安全性。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及IPC C07K14，更具体的，涉及一种抗菌肽及其应用。

背景技术

抗菌肽，广泛地存在于多种生物体，是一种具有生物活性的小分子多肽，这类活性小分子多肽普遍具有强碱性、热稳定性和光谱抗菌等特点，可以作为抵抗病原微生物入侵的重要防线。

现有专利CN201910381420.1公开了分离植物抗菌肽的方法、植物抗菌肽和植物抗菌肽的用途。该抗菌肽从黑芝麻中分离获得，具有抑制白色念珠菌和流感嗜血杆菌的作用。但未显示对其它细菌的抑制作用。

现有专利CN201811277061.7公开了一种纯化制备抗菌肽的方法，通过优化步骤工艺和参数，使半透膜纯化和反向色谱法纯化相互促进，分离纯化高纯度的抗菌肽。现有分离抗菌肽的技术已得到较好的发展。

但目前抗菌肽的种类还不多，且现有部分抗菌肽的溶血性能较强，生物安全性还有待提高。本发明开发了一种新的抗菌肽及其应用，主要抑制痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌，且其生物安全性高。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明第一方面提供了一种抗菌肽，所述一种抗菌肽为抗菌肽1、抗菌肽2、抗菌肽3、抗菌肽4、抗菌肽5、抗菌肽6、抗菌肽7、抗菌肽8、抗菌肽9、抗菌肽10、抗菌肽11、抗菌肽12、抗菌肽13、抗菌肽14、抗菌肽15、抗菌肽16、抗菌肽17、抗菌肽18中的任意一种，所述抗菌肽1的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示，所述抗菌肽2的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示，所述抗菌肽3的氨基酸序列如SEQ ID No：3所示，所述抗菌肽4的氨基酸序列如SEQ ID No：4所示，所述抗菌肽5的氨基酸序列如SEQ ID No：5所示，所述抗菌肽6的氨基酸序列如SEQ ID No：6所示，所述抗菌肽7的氨基酸序列如SEQ ID No：7所示，所述抗菌肽8的氨基酸序列如SEQ ID No：8所示，所述抗菌肽9的氨基酸序列如SEQ ID No：9所示，所述抗菌肽10的氨基酸序列如SEQ ID No：10所示，所述抗菌肽11的氨基酸序列如SEQID No：11所示，所述抗菌肽12的氨基酸序列如SEQ ID No：12所示，所述抗菌肽13的氨基酸序列如SEQ ID No：13所示，所述抗菌肽14的氨基酸序列如SEQ ID No：14所示，所述抗菌肽15的氨基酸序列如SEQ ID No：15所示，所述抗菌肽16的氨基酸序列如SEQ ID No：16所示，所述抗菌肽17的氨基酸序列如SEQ ID No：17所示，所述抗菌肽18的氨基酸序列如SEQ IDNo：18所示。

本发明基于机器学习的方法生成抗菌肽。利用生成模型从大规模多肽数据库学习多肽的特征向量表示，然后利用抗菌肽数据库训练机器模型分类器，筛选出具有抗菌功能的预测序列。

本发明第二方面，提供了所述抗菌肽的制备方法，可以通过基因工程的方法人工合成，并从细胞中通过分离纯化的方法直接获得或直接通过化学合成制备得到。

优选地，所述合成步骤如下所述：

(1)多肽合成顺序是从C端到N端：将2-Chlorotrityl Chloride Resin 10g放入反应管中，加15mL/g(毫升/克)DCM(二氯甲烷)，震荡30分钟。

(2)接第一个氨基酸：通过沙芯抽滤掉溶剂，加入3倍摩尔过量的Fmoc-氨基酸-OH氨基酸，加入DMF(二甲基甲酰胺)溶解，再加入10倍摩尔过量的DIEA(N,N-二异丙基乙胺)，震荡90分钟。用甲醇封闭。

(3)脱保护：除去DMF，加15ml/g 20％哌啶DMF溶液，洗涤5分钟后，除去20％哌啶DMF溶液，再加入15ml/g 20％哌啶DMF溶液，洗涤15分钟。