[发明专利]一种高产S-腺苷-L-蛋氨酸的酿酒酵母工程菌及其应用在审
申请号: | 202211253301.6 | 申请日: | 2022-10-13 |
公开(公告)号: | CN115820443A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 胡忠策;王舒楠;潘俊超;郑垂木;陶云超;王远山;柳志强;郑裕国 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/53;C12P19/40;C12R1/865 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高产 腺苷 蛋氨酸 酿酒 酵母 工程 及其 应用 | ||
1.一种高产S-腺苷-L-蛋氨酸的酿酒酵母工程菌,其特征在于,所述酿酒酵母工程菌以酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)ZJ10041菌株为底盘菌株,将其基因组中的SOD1基因敲除,获得高产S-腺苷-L-蛋氨酸的酿酒酵母ZJ10041-△SOD1菌株。
2.如权利要求1所述的高产S-腺苷-L-蛋氨酸的酿酒酵母工程菌,其特征在于,所述SOD1基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种权利要求1所述酿酒酵母工程菌在微生物发酵制备S-腺苷-L-蛋氨酸中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述应用为:将所述酿酒酵母工程菌菌株接种至原始发酵培养基中,30℃、160-200rpm条件下培养20-30h后,加入L-蛋氨酸,继续培养至48-72h,发酵结束后,发酵液离心收集酿酒酵母菌,提取获得S-腺苷-L-蛋氨酸;所述原始发酵培养基组成如下:葡萄糖30g/L,酵母粉5g/L,(NH4)2SO4 5g/L,K2HPO45g/L,KH2PO4 10g/L,MnSO4·7H2O 0.1g/L,ZnSO4·7H2O 0.1g/L,MgSO4 0.2g/L,CaCl20.1g/L,CuSO4 0.0016g/L,柠檬酸三钠二水合物0.1g/L,溶剂为水,pH7.0。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述L-蛋氨酸以36g/L的L-蛋氨酸水溶液形式加入,L-蛋氨酸加入量以原始发酵培养基体积计为1.3-2.0g/L。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述酿酒酵母工程菌发酵前,先接种至YPD液体培养基中,于30℃,150-180rpm培养12h,然后以体积浓度4%接种至原始发酵培养基中培养。
7.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述原始发酵培养基为摇瓶发酵培养基,所述摇瓶发酵培养基组成为:葡萄糖30g/L,酵母粉5g/L,(NH4)2SO4 5g/L,K2HPO4 5g/L,KH2PO410g/L,MnSO4·7H2O 0.1g/L,ZnSO4·7H2O 0.1g/L,MgSO4 0.2g/L,CaCl2 0.1g/L,CuSO40.001 6g/L,柠檬酸三钠二水合物0-0.5g/L,对氨基苯甲酸0-0.6g/L,腺苷0-1.0g/L,硫酸亚铁0-0.40g/L,溶剂为水,pH5.0-7.0。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述摇瓶发酵培养基组成为:葡萄糖30g/L,酵母粉5g/L,(NH4)2SO4 5g/L,K2HPO4 5g/L,KH2PO4 10g/L,MnSO4·7H2O 0.1g/L,ZnSO4·7H2O 0.1g/L,MgSO4 0.2g/L,CaCl2 0.1g/L,CuSO4 0.001 6g/L,柠檬酸三钠二水合物0.4g/L,对氨基苯甲酸0.1g/L,腺苷0.6g/L,硫酸亚铁0.1g/L,溶剂为水,初始pH 6.5。
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