[发明专利]一种抑杀多子水霉的淡水养殖源假单胞菌

说明书

本发明涉及一种抑杀多子水霉的淡水养殖源假单胞菌，所述淡水养殖源假单胞菌为猴假单胞菌(Pseudomonas simiae)TGYZ，保藏号为CGMCC NO.24227。本发明菌株可以通过破坏水霉菌丝管壁和孢子囊壁，致使菌丝和囊内孢子大量逸出并死亡，从而实现对我国鱼类主要病菌——多子水霉生长的高效抑制甚至杀灭。由于假单胞菌为淡水养殖环境常见菌，因此，合理使用该菌不会对养殖环境造成危害，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于淡水养殖领域，特别涉及一种抑杀多子水霉的淡水养殖源假单胞菌。

背景技术

水霉病(Saprolegniasis)是一种全球范围内淡水养殖中常见的鱼类疾病，病原菌以水霉属(Saprolegnia)、绵霉属(Achlya)和丝囊霉属(Aphanomyces)为主。由于水霉菌宿主广泛、传染迅速，低温季节常常在短时间内即可造成养殖淡水鱼及其苗种和鱼卵大面积暴发水霉病。有关研究表明，多子水霉(S.ferax)是我国的主要致病种类。自从有效防治水霉病的化学药物如孔雀石绿等被列为禁用渔药后，目前可供选择的绿色防治药物种类甚为有限，因此，基于生物安全理念，筛选、研制新的绿色抗霉制剂，一直是生产一线的迫切需求。

假单胞菌属作为微生物的研究热点之一，目前多认为其生物防治的机制是它可以分泌一种或多种抗菌物质来抑制病原微生物的生长，从而实现其生物防治的作用。研究表明，北极假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)可通过其产生的抗真菌活性物质抑制多种植物病原菌，用其制成的杀菌制剂对在低温条件10～15℃下对植物真菌病害灰霉病的防治效果高达66.7％。而假单胞菌在水霉病防治中的应用较少。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种抑杀多子水霉的淡水养殖源假单胞菌，可以高效抑制甚至杀灭我国鱼类病菌多子水霉。

本发明提供了一种抑杀多子水霉的淡水养殖源假单胞菌，所述淡水养殖源假单胞菌为猴假单胞菌(Pseudomonas simiae)TGYZ，保藏号为CGMCC NO.24227。

所述猴假单胞菌TGYZ的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述猴假单胞菌TGYZ抑制多子水霉的方法为：将振荡培养后的猴假单胞菌TGYZ菌液在PDA平板上涂布成一条菌带，置于28℃的恒温培养箱中培养24h后，再置于20℃的恒温培养箱中与多子水霉菌块对峙培养。

所述猴假单胞菌TGYZ抑杀多子水霉的方法为：无菌吸取用灭菌水稀释后的猴假单胞菌TGYZ菌液，加入6孔板中，再无菌切取一块长满多子水霉菌丝的PDA琼脂块放入菌液中，于20℃恒温培养箱中共培养。

所述振荡培养温度为28-30℃，振荡速度为150-200r/min，振荡培养时间为15-20h。

所述猴假单胞菌TGYZ与多子水霉平板对峙的观察时间长度以对照板多子水霉长满或接近长满为准。

猴假单胞菌(Pseudomonas simiae)TGYZ已于2021年12月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其简称为CGMCC，保藏编号为NO.24227。

有益效果

本发明的菌株从淡水鱼养殖环境分离得到，是养殖水体正常菌，合理使用不会对周围环境与生态平衡造成危害，符合生物安全法规；该菌株能够高效抑制甚至杀灭我国鱼类病菌多子水霉，平板菌丝生长抑制率可达76.32％；液体共培养时，可以通过破坏水霉菌丝管壁和孢子囊壁，致使菌丝和囊内孢子大量逸出并死亡。

附图说明

图1为实施例3中猴假单胞菌TGYZ抑制多子水霉生长后，观察到的菌丝宏观生长情况：A：TGYZ抑制后菌丝生长状况，B：阴性对照板多子水霉菌丝生长状况。