[发明专利]一种抑杀寄生水霉的淡水养殖源假单胞菌

说明书

本发明涉及一种抑杀寄生水霉的淡水养殖源假单胞菌，所述淡水养殖源假单胞菌为假单胞菌(Pseudomonas soli)LTBXJ，保藏号为CGMCC NO.24225。本发明菌株可以通过破坏水霉菌丝管壁和孢子囊壁，致使菌丝脱落死亡以及菌丝和囊内孢子大量逸出并死亡，从而实现对我国鱼类主要病菌——寄生水霉生长的高效抑制甚至杀灭。由于假单胞菌为淡水养殖环境常见菌，因此，合理使用该菌不会对养殖环境造成危害，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于淡水养殖领域，特别涉及一种抑杀寄生水霉的淡水养殖源假单胞菌。

背景技术

寄生水霉(Saprolegnia parasitica)广泛分布于养殖水体中，是全球水产养殖业面临的重要病原，可感染淡水养殖鱼类、甲壳类以及两栖类等种属的很多养殖种类。体表损伤的鱼类和孵化过程中的鱼卵尤其易被感染。寄生水霉也是我国的主要鱼类致病菌。本研究表明，从浙江养殖淡水分离的一株假单胞菌(P.soli)对寄生水霉具有很强的抑制作用，具有制备新型绿色水霉制剂的潜力，可为化学药物的退出提供一种选择。

一般认为假单胞菌通过分泌一种或多种抗菌物质来抑制病原微生物的生长，具备成为新型生物防治药物的潜力。研究表明，假单胞菌的无菌细胞破碎上清液在对峙平板上具有显著抑制水霉菌丝生长的作用，其对菌丝生长的最小有效抑制浓度为6.25mg/mL，对孢子萌发的最小有效抑制浓度为3.125mg/mL。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种抑杀寄生水霉的淡水养殖源假单胞菌，可以高效抑制甚至杀灭我国鱼类病菌寄生水霉。

本发明提供了一种抑杀寄生水霉的淡水养殖源假单胞菌，所述淡水养殖源假单胞菌为假单胞菌(Pseudomonas soli)LTBXJ，保藏号为CGMCC NO.24225。

所述假单胞菌LTBXJ的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述假单胞菌LTBXJ抑制寄生水霉的方法为：将振荡培养后的假单胞菌LTBXJ菌液在 PDA平板上涂布成一条菌带，置于28℃的恒温培养箱中培养24h后，再置于20℃的恒温培养箱中与寄生水霉菌块对峙培养。

所述假单胞菌LTBXJ抑杀寄生水霉的方法为：无菌吸取用灭菌水稀释后的假单胞菌 LTBXJ菌液，加入6孔板中，再无菌切取一块长满寄生水霉菌丝的PDA琼脂块放入菌液中，于20℃恒温培养箱中共培养。

所述振荡培养温度为28-30℃，振荡速度为150-200r/min，振荡培养时间为15-20h。

所述假单胞菌LTBXJ与寄生水霉平板对峙的观察时间长度以对照板寄生水霉长满或接近长满为准。

假单胞菌(Pseudomonas soli)LTBXJ已于2021年12月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京，其简称为CGMCC，保藏编号为CGMCCNO.24225。

有益效果

本发明的菌株从淡水鱼养殖环境分离得到，是养殖水体正常菌，合理使用不会对周围环境与生态平衡造成危害，符合生物安全法规；该菌株能够高效抑制甚至杀灭我国鱼类病菌寄生水霉，平板菌丝生长抑制率可达76.92％；液体共培养时，可以通过破坏水霉菌丝管壁和孢子囊壁，致使菌丝脱落死亡以及菌丝和囊内孢子大量逸出并死亡。

附图说明

图1为实施例3中假单胞菌LTBXJ抑制寄生水霉生长后，观察到的菌丝宏观生长情况：A： LTBXJ抑制后菌丝生长状况，B：阴性对照板寄生水霉菌丝生长状况。

图2为实施例3中假单胞菌LTBXJ抑制寄生水霉生长后，观察到的菌丝微观生长情况：A： LTBXJ抑制后菌丝生长状况(115×)，B：阴性对照板寄生水霉菌丝生长状况(40×)。