[发明专利]一种靶向云杉花墨天牛嗅觉基因的dsRNA、引物对及其应用在审
申请号: | 202211263130.5 | 申请日: | 2022-10-14 |
公开(公告)号: | CN115838723A | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
发明(设计)人: | 张苏芳;张荣;张珣;樊智智;张真;孔祥波;刘福;方加兴 | 申请(专利权)人: | 中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/11;C12N15/89;C12N15/10 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 苏士莹 |
地址: | 100091*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 靶向 云杉 天牛 嗅觉 基因 dsrna 引物 及其 应用 | ||
1.一种靶向云杉花墨天牛嗅觉基因的dsRNA,其特征在于,所述dsRNA包括dsCSP3、dsCSP5、dsOBP14、dsOBP28、dsOR1和dsSNMP1中的一种或多种;
所述dsCSP3的其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;
所述dsCSP5的其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;
所述dsOBP14的其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;
所述dsOBP28的其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示;
所述dsOR1的其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示;
所述dsSNMP1的其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
2.一种扩增权利要求1所述dsRNA的引物组,其特征在于,所述引物组包括引物对1~6中的一种或多种;
引物对1的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示;引物对1的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示;
引物对2的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示;引物对2的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示;
引物对3的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示;引物对3的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示;
引物对4的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示;引物对4的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.14所示;
引物对5的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.15所示;引物对5的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.16所示;
引物对6的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.17所示;引物对6的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.18所示。
3.权利要求1所述dsRNA的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
以云杉花墨天牛的cDNA为模板,利用权利要求2所述的引物组进行PCR扩增,得到PCR产物;
以所述PCR产物为模板,采用dsRNA合成试剂盒制备得到所述dsRNA。
4.权利要求1所述的dsRNA或权利要求2所述的引物组或利用权利要求3所述制备方法得到的dsRNA在防治云杉花墨天牛中的应用。
5.权利要求1所述的dsRNA或权利要求2所述的引物组或利用权利要求3所述制备方法得到的dsRNA在制备防治云杉花墨天牛的产品中的应用。
6.权利要求1所述的dsRNA或权利要求2所述的引物组或利用权利要求3所述制备方法得到的dsRNA在降低云杉花墨天牛嗅觉识别能力中的应用。
7.权利要求1所述的dsRNA或权利要求2所述的引物组或利用权利要求3所述制备方法得到的dsRNA在制备降低云杉花墨天牛嗅觉识别能力的产品中的应用。
8.一种防治云杉花墨天牛的制剂,其特征在于,所述制剂包括权利要求1所述的dsRNA。
9.一种防治云杉花墨天牛的方法,包括:将权利要求1所述的dsRNA或利用权利要求3所述制备方法得到的dsRNA导入云杉花墨天牛体内。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述导入的方法包括注射。
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